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初学生信——双端测序原理

發布時間:2023/12/19 综合教程 28 生活家
生活随笔 收集整理的這篇文章主要介紹了 初学生信——双端测序原理 小編覺得挺不錯的,現在分享給大家,幫大家做個參考.

參考:

https://zhuanlan.zhihu.com/p/61963366

一、目的

講解二代測序如何從很短的reads拼接為一個完整的基因組(雙端測序,如何對 paired-end 進行拼接)

二、單端測序

測序中最簡單的辦法,只有一種測序引物,使得PCR只能沿著這個引物的方向進行,所有的reads都只能按照一個方向進行讀取。但是這帶來了一些問題,以illumina為例,測序的質量會隨著測序的進行而下降,所以reads越向后越不準確;后來,研究者們想出來的解決辦法就是雙端測序,對一個長為500bp的序列,單端測序下游質量會很差,但是從兩個方向上分別測250bp-300bp然后再拼接起來,就可以大大提高測序的準確率了。

三、雙端測序

雙端測序的接頭序列比較復雜,首先在兩個方向上分別進行測序,就需要有兩個不同方向的測序引物(下圖Rd1 SP和Rd2 SP);其次,為了區別兩個方向的reads(分為read1和read2),其中一個測序引物前面要添加一小段index序列進行標記。

在雙端測序中,每一個read的長度都要超過整個待測序列的一半。所以。可以根據兩個reads重合的部分進行拼接:

總結

以上是生活随笔為你收集整理的初学生信——双端测序原理的全部內容,希望文章能夠幫你解決所遇到的問題。

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