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tunel凋亡试剂盒说明书_急求!!罗氏TUNEL试剂盒( In Situ Cell Death Detection Kit, TMR red )中文说明书或者操作步骤,急急急!!谢谢啦!...

發(fā)布時(shí)間:2023/12/20 42 豆豆
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因?yàn)闆]有做過實(shí)驗(yàn),而且英文不咋地,我手上有英文說明書,大概知道;但是,具體步驟還是有點(diǎn)混亂,幫幫我這個(gè)初學(xué)者吧!我講感激不盡!由衷的感謝您!

這是我翻譯的,但是還是覺得不對,現(xiàn)在不知道怎么辦了?請幫下我吧!

TUNEL凋亡檢測:

Step?1:60℃烤片30min,二甲苯脫蠟,梯度乙醇水化,雙蒸水。

Step?2:破膜劑中孵育8分鐘0.1%?Triton?X–100,?0.1%?sodium?citrate,freshly?prepared(或者??Place?the?slide(s)?in?a?plastic?jar?containing?200?ml?0.1?M?Citrate?buffer,?pH?6.0.??Apply?350?W?microwave?irradiation?for?5?min.,若選擇微波照射時(shí),與下面微波照射作用有什么不同???)

Step?3:PBS沖洗3×5min

Step?4:侵入塑料瓶子200ml0.1MpH6.0檸檬酸鹽緩沖液修復(fù)

Step?5:750W微波照射1分鐘

Step?6:立即添加20-25℃雙蒸水80ml冷卻(自然冷卻)

Step?7:PBS沖洗3×5min

Step?8:侵入0.1M?Tris-HCl,pH?7.5?30分鐘,(包含3%?BSA牛血清白蛋白和20%牛血清)

Step?9:PBS沖洗3×5min遍,擦片

Step?10:滴加50ul配置好的TUNEL工作液。陰性對照組滴加50ul?2號(hào)液。陽性對照組在TUNEL前滴加DNase?I?recombinant.

Step?11:37℃濕盒中避光孵育1小時(shí)

Step?12:PBS沖洗3×5min

Step?13:50%甘油硫酸鹽緩沖液封片,激光共聚焦顯微鏡下觀察。

總結(jié)

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