【摘要】目的：產碳青霉烯酶腸桿菌科細菌在全球范圍內的廣泛播散是臨床抗感染疾病診治工作的一個重大挑戰，因此，快速、準確地檢測這些微生物至關重要。本研究建立了一種免疫層析技術（Carba5），并評價該技術對五種主要碳青霉烯酶（KPC、NDM、VIM、IMP和OXA-48-like型）的鑒定價值。方法：回顧性和前瞻性收集腸桿菌科臨床菌株共計296株，挑取單克隆菌落于提取緩沖液中，充分混勻后滴加于Carba5檢測板條的檢測孔中，反應15分鐘直接讀取檢測結果。結果：296株待檢菌中有185株被正確地檢出含有Carba5中的靶標酶；除個別菌株產的OXA-163和OXA-405的碳青霉烯酶因活性低而未被測出，其余菌株檢測結果均為陰性。整個檢測過程均在15分鐘內完成；未觀察到與其他非靶標酶間的交叉反應，如ESBLs、AmpCs或苯唑西林酶（OXA-1、-2、-9和-10型酶）。該方法的靈敏度為100%，特異性分別為回顧性菌株95.3%和前瞻性100%。結論：Carba5能夠有效地檢測五種主要碳青霉烯酶，該法快速、簡便，易于在臨床微生物實驗室作為常規工作開展。

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產碳青霉烯酶的細菌在世界范圍內的廣泛播散給我們帶來了巨大的經濟壓力，已然成為了一個全球共同關注的問題[1, 2]。在這些產酶耐藥菌中，腸桿菌科細菌是醫院感染的主要病原體（其中腸桿菌科細菌中的大腸埃希菌同時也是社區獲得性感染的病原體）。產碳青霉烯酶腸桿菌科細菌（carbapenemase-producing Enterobacteriaceae，CPE）往往是多重耐藥菌，由其引起的感染，臨床可用的抗菌藥物選擇非常少，有時候甚至無藥可用[3, 4]。基于此，CPE毋庸置疑地成為了公共衛生事業的嚴重威脅。因此，快速檢測及確診CPE對臨床醫生及時采取有效感控措施、調整抗菌治療方案以及改善預后等非常重要。根據氨基酸序列的不同，碳青霉烯酶可以分為三類，即Ambler分類的A、B和D型。碳青霉烯酶型別不一樣對抗生素的水解活性也有差異，有的很弱、有的很強：比如，B類金屬碳青霉烯酶對頭孢他啶/阿維巴坦有很強的水解活性，而A類KPC型碳青霉烯酶卻沒有[5, 6]。因此，在臨床診治工作中非常有必要對酶型進行具體區分。

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目前，臨床微生物實驗室主要在用的碳青霉烯耐藥菌檢測方法包括表型檢測方法、分子檢測方法及抗體包被檢測技術等，不同的檢測方法各有優勢，也有一定應用局限性。根據檢測細菌對碳青霉烯類抗生素的水解活性為原理的表型診斷方法有基質飛行質譜技術（MALDI-TOF MS）[7, 8]、生化反應試驗（如Carba-NP試驗及其改良的方法）[9, 10]、碳青霉烯類滅活實驗（carbapenem inactivation method，CIM試驗）[11]和OXA-48紙片試驗[12, 13]等；此外，有研究者探索性地證明了其他在臨床上較廣泛應用的表型確認方法的價值性，但是缺點是耗時長，需要24小時完成，這些方法亦不能檢測出具體的碳青霉烯酶型別[13, 14]。除表型檢測方法外，分子診斷方法無疑彌補了這一缺陷，如終點PCR和實時熒光定量PCR。通過單通道或多通道PCR擴增實現對多種碳青霉烯酶基因型的直接檢測，具有較高的靈敏度及特異性的優勢[15-17]；然而這些方法價格昂貴，而且需要高水平的專業技術才能獲得準確的結果，并不適合全球所有的臨床微生物實驗室。免疫層析法（lateral flow immunoassay，LFIA）是一種通過將不同型別的碳青霉烯酶抗體包被于固態基質上、根據抗原-抗體結合的原理實現對CPE及具體碳青霉烯酶酶型的檢測方法[18-22]。LFIA法不能同時檢測五種主要碳青霉烯酶，但具有快速——在15分鐘內完成對純菌落的直接檢測，且100%靈敏度和特異性的顯著優勢。

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總結

以上是生活随笔為你收集整理的多重免疫层析技术在产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌快速鉴定中的价值的全部內容，希望文章能夠幫你解決所遇到的問題。

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