不同实验样品在实时荧光定量PCR检测中要求有哪些?
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不同实验样品在实时荧光定量PCR检测中要求有哪些?
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實時熒光定量PCR被常用于檢測生物樣品,同時也是檢測DNA、RNA含量的最普遍的方法,通過熒光染料或熒光標記的特異性的探針,對PCR產物進行標記跟蹤,實時在線監控反應過程,結合相應軟件可以對產物進行分析,計算待測樣品模板的初始濃度。針對于不同的實驗樣品,進行實時熒光定量PCR檢測時有不同的要求,本文將介紹給大家,動物組織樣品、植物樣品、細胞樣品、全血樣品、RNA樣品的樣品要求。?
不同實驗樣品在實時熒光定量PCR檢測中要求:
1.?動物組織:樣本離體應當立即放入液氮或-80℃冰箱中速凍保存,避免反復凍融,并且樣本在-80℃的保存時間不宜過長,組織寄送100mg以上,脂肪組織,結締組織,纖維化組織適當增加,干冰運輸;
2.植物:新鮮的葉、果肉、種子等最少需100mg,干冰運輸。
3.細胞:1×10^6個細胞,加入trizol的細胞樣本(不要直接運輸加trizol的細胞培養皿),Trizol?為裂解液,不適用于組織樣本的保存,細胞除外,干冰運輸;
4.全血:最少1 mL新鮮血液EDTA抗凝管,4度運輸;?血清:最少1 mL,干冰運輸;
5.RNA樣品:?OD260/280為1.8-2.0,濃度≥100 ng/μL,體積≥20μL,干冰運輸;cDNA:cDNA原液≥20 μL,干冰運輸;
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總結
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