点成分享 | 离心机的原理、分类、应用及其在新冠病毒分离中的使用
一、應(yīng)用場景
實驗室離心機(jī)是一種通過繞固定軸對物體進(jìn)行旋轉(zhuǎn),使其受到離心力作用而加速物質(zhì)沉降速度并實現(xiàn)不同分子顆粒分離的實驗設(shè)備。
離心機(jī)廣泛應(yīng)用于化工、食品、制藥、環(huán)保、教學(xué)、醫(yī)療等科學(xué)研究和生產(chǎn)部門,在物質(zhì)分離和提取方面起到十分重要的作用,已成為現(xiàn)代科學(xué)研究重要儀器設(shè)備之一,更是生物學(xué)、生物化學(xué)、醫(yī)學(xué)、生物工程、生物制藥等行業(yè)科研與生產(chǎn)的必備設(shè)備。
二、原理
離心是利用離心力將顆粒/不同沉降系數(shù)的物質(zhì)從溶液中分離出來的一種技術(shù)。離心機(jī)就是應(yīng)用了離心原理,根據(jù)顆粒的大小、形狀、密度、溶液粘度等差異,通過離心機(jī)上轉(zhuǎn)子的高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生強(qiáng)大的離心力,加快混合液中不同比重成分的沉降速度,把樣品中不同沉降系數(shù)和浮力密度的物質(zhì)分離或分層分級,離心過程中密度較大的粒子會被更快地拋到離心管外側(cè),而較輕的顆粒則會移向中心,這樣可以分離出懸浮液中的固體顆粒或者不同密度的液體成分。
(圖片來源于網(wǎng)絡(luò))
三、分類
目前市面上離心機(jī)的種類繁多,在不同領(lǐng)域有不同適用的離心機(jī)。根據(jù)轉(zhuǎn)速不同、是否制冷、設(shè)備大小等標(biāo)準(zhǔn)可以進(jìn)行以下分類:
根據(jù)轉(zhuǎn)速不同,可以分為:低速離心機(jī)、高速離心機(jī)、超高速離心機(jī)等
根據(jù)是否制冷,可以分為:冷凍離心機(jī)和普通離心機(jī)等
根據(jù)應(yīng)用場景,可以分為:實驗室離心機(jī)和工業(yè)離心機(jī)等
根據(jù)設(shè)備大小。又可以分為:迷你離心機(jī)、臺式離心機(jī)、立式離心機(jī)等
四、實驗室離心機(jī)常見應(yīng)用
常用于不相溶液體的分離、 蛋白質(zhì)提純、懸乳液沉淀分離、細(xì)胞提取、DNA/RNA提取、PCR板離心、生物成分沉淀等應(yīng)用。
(圖片來源于網(wǎng)絡(luò))
五、離心機(jī)在新冠病毒研究中的應(yīng)用
在如今新冠肺炎疫情成為了常態(tài)性現(xiàn)狀的背景下,對于新冠病毒的研究是當(dāng)前生物學(xué)、醫(yī)學(xué)等科研人員研究的一大重點。2020年初,北京協(xié)和醫(yī)院就發(fā)布了新冠病毒操作指南,在整個參考實驗過程中,病毒樣本的裂解過程是多次需要使用到離心機(jī)的。
病毒樣品的裂解過程中,全程都建議在生物安全柜中使用離心機(jī),這樣可以有效防止樣品泄漏和污染帶來的麻煩,實驗中用到的離心機(jī)轉(zhuǎn)速要求需要達(dá)到8000rpm及以上,這屬于高速離心機(jī),且要可適配低容量EP管。
以下是官方提供的病毒樣本裂解的參考過程:
1、用1.5ml的無菌離心管(EP管),移液器移取560μl 的AVL裂解液,并加入5.6μl Carrier RNA和140μl已滅活的待提取核酸的待測樣本,渦旋振蕩15s,室溫靜置10min;
2、將上述EP管放入離心機(jī)內(nèi)瞬時離心以去除可能殘留在EP管蓋上的裂解產(chǎn)物,防止污染;
3、裂解完成后,向EP管中加入560μl無水乙醇,并振蕩混勻15s;
4、再次將上述EP管放入離心機(jī)內(nèi)瞬時離心以去除可能殘留在EP管蓋上的裂解產(chǎn)物,防止污染;
5、向離心柱加入裂解產(chǎn)物630μl,并用8000rpm轉(zhuǎn)速離心1min;建議在生物安全柜中進(jìn)行離心,防止樣品泄漏和污染帶來的危害;若離心機(jī)在生物安全柜之外,則每次使用前都需進(jìn)行外表面消毒。
6、更換廢液收集管,要從離心機(jī)中小心取出離心柱,將上層離心柱轉(zhuǎn)移到新收集管中,繼續(xù)將剩余裂解產(chǎn)物630μl加入離心柱中,若樣本體積大于140μl時需重復(fù)此步驟,直到全部裂解產(chǎn)物都過柱離心,8000 RPM轉(zhuǎn)速離心1min,之后小心地將離心柱轉(zhuǎn)移到新的收集管中;
7、取500μl AW1加入離心柱中(注意,此處加樣操作時務(wù)必將移液器吸頭接觸離心柱內(nèi)壁緩慢加樣),8000 rpm轉(zhuǎn)速離心1min,小心取出離心柱,更換新的收集管;
8、取500μl AW2加入離心柱中,14000rpm轉(zhuǎn)速離心3min,小心取出離心柱,更換新的離心柱上端收集管,置于離心機(jī)中使用最大轉(zhuǎn)速離心1min,以確保將AW2中的殘液完全離心干凈;
9、取無菌1.5mlEP管收集核酸。將離心柱上端小心放入1.5mlEP管中,取40-60μl的洗脫液AVE加入到離心柱中(注意:洗脫液應(yīng)盡量全部覆蓋住離心柱膜),用EP管的管蓋蓋住離心柱,使用無菌剪刀剪去原離心柱管蓋;
10、室溫靜置1min,將其放入離心機(jī)中8000rpm轉(zhuǎn)速離心1min來回收核酸;
11、丟棄離心柱,此時EP管中就是我們想要提取的核酸了,之后做好標(biāo)記與登記。
總結(jié)
以上是生活随笔為你收集整理的点成分享 | 离心机的原理、分类、应用及其在新冠病毒分离中的使用的全部內(nèi)容,希望文章能夠幫你解決所遇到的問題。
- 上一篇: 【20号微软推广正版验证】
- 下一篇: 金山手机卫士正式版发布 永久免费