1、western blot 的優(yōu)點

答： 靈敏，可達(dá)ng級，用Ecl顯色法理論上可達(dá)pg 級。方便，特異性高。

?

2、為什么我的細(xì)胞提取液中沒有目標(biāo)蛋白？

答： 原因有很多：

a) 你的細(xì)胞中不表達(dá)這種蛋白質(zhì)，換一種細(xì)胞；

b) 你的細(xì)胞中的蛋白質(zhì)被降解掉了，你必需加入PMSF，抑制蛋白酶活性；

c) 你的抗體不能識別目標(biāo)蛋白，多看看說明，看是否有問題。

?

3、我的細(xì)胞提取液有的有沉淀，有的很清亮，為什么呢？

答： a) 有沉淀可能因為你的蛋白沒有變性完全，可以適當(dāng)提高SDS 濃度，同時將樣品煮沸時間延長， b) 也不排除你的抗原濃度過高，這時再加入適量上樣緩沖液即可。

?

4、我做的蛋白質(zhì)分子量很小（10KD），請問怎么做WB？

答：可以選擇0.2μml的膜，同時縮短轉(zhuǎn)移時間。也可以將兩張膜疊在一起，再轉(zhuǎn)移。其他按步驟即可。

?

文章剩余內(nèi)容<<<<

?

總結(jié)

以上是生活随笔為你收集整理的WB, IHC实验问题总结与处理方案的全部內(nèi)容，希望文章能夠幫你解決所遇到的問題。

如果覺得生活随笔網(wǎng)站內(nèi)容還不錯，歡迎將生活随笔推薦給好友。