原代脂肪细胞提取的准备内容
背景知識(shí)
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肥胖是能量攝入與消耗失衡引起的脂肪過度堆積,由脂肪能量代謝異常所致。是糖尿病、高血壓、高血脂、脂肪肝和心血管疾病等代謝綜合征的重大風(fēng)險(xiǎn)因素。根據(jù)脂肪組織的不同形態(tài)、分布和功能,分為儲(chǔ)存能量的白色脂肪(以小鼠腹腔脂肪eWAT為主)以及產(chǎn)熱并消耗能量的棕色脂肪(BAT,位于小鼠肩胛骨之間)和米色脂肪(以小鼠腹股溝皮下脂肪iWAT為主)[1-2]。脂肪組織因其在能量調(diào)控、炎癥反應(yīng)和免疫應(yīng)答方面的作用已被認(rèn)為是一個(gè)內(nèi)分泌器官。此外,它還是具有多向分化潛能的多功能細(xì)胞的來源之一,而這種多功能細(xì)胞就存在于脂肪組織的血管基質(zhì)(SVF, Stromal Vascular Fraction)部分中[3]。
SVF細(xì)胞代表一組異質(zhì)性的細(xì)胞群,在脂肪組織中它們圍繞在脂肪細(xì)胞的周圍。將脂肪組織切碎,消化,離心后,可以得到SVF,其中含有間充質(zhì)干細(xì)胞、內(nèi)皮前體細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、周細(xì)胞以及還有豐富的、可塑性極強(qiáng)的脂肪組織來源的前體脂肪細(xì)胞。
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原代提取的前期準(zhǔn)備
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1、滅菌的手術(shù)器械+含有2ml DMEM basic培養(yǎng)基的小皿
★?手術(shù)器械
包括足量的剪刀、鑷子,不同小鼠、不同組織勿混用器械。器械提前進(jìn)行高溫高壓滅菌,備用。
★DMEM basic
37℃預(yù)熱。保證脂肪離體后的濕潤環(huán)境。
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來源:51xxziyuan.com
總結(jié)
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