作為一個實驗新手，很多時候提質粒提出來的濃度都有很大差異，有的高達500~600ng/uL，有的卻只有幾十。用的都是相同的菌株和試劑盒，為什么小提濃度會有這么大的差別呢？

要解決這個問題，我們得先來了解下質粒。‘

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拷貝數

對于質粒載體，拷貝數是我們最關心的特性之一。實際上，每個細菌中的質粒的拷貝數主要決定于質粒本身的復制特性。按照復制性質，可以把質粒分為兩類：

嚴緊型質粒：當細菌染色體復制一次時，質粒也復制一次，每個細菌內只含1～2個質粒；

松弛型質粒：當細菌染色體復制停止后仍然能繼續復制，每一個細菌內一般含20個左右質粒拷貝。這些質粒的復制是在寄主的松弛控制之下的，每個細菌中含有10-200份拷貝，如果用一定的藥物處理抑制寄主蛋白質的合成還可使質粒拷貝數增至幾千份。

當然，恒定的拷貝數與質粒復制控制系統、質粒的大小及培養條件有關。

那么到這里你可能會問，高拷貝質粒我們可以多提一點質粒，低拷貝數的質粒有什么作用呢？確實，低拷貝數的質粒用途不是十分廣闊，主要用于以下兩點：

高拷貝數的質粒往往不穩定，進行大片段克隆或者帶有毒性DNA克隆時會用低拷貝；

質粒的擴增會占用大量資源，當載體用于表達或者其他用途時，也會使用上低拷貝質粒。

質粒的接合轉移與穿梭質粒

質粒的接合轉移：是細菌遺傳物質轉移的一個重要方式。在質粒轉移過程中，供體菌和受體菌通過結合作用緊密接觸，質粒從供體細胞向受體轉移，同時進行質粒復制。按能否自主轉移，可以將天然存在的質粒分為轉移型質粒和非轉移型質粒兩大類。

這里要注意的是，獲得質粒的細菌可隨之而獲得一些生物學特性，如耐藥性或產生細菌素的能力等。從環境友好出發，實驗室里的廢棄菌液，一定要滅過菌才能倒哦。

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來源：51xxziyuan.com

總結

以上是生活随笔為你收集整理的关于质粒，学生物的你应该知道的那些事儿的全部內容，希望文章能夠幫你解決所遇到的問題。

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