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高通量数据分析必备|基因组浏览器使用介绍 - 1

發(fā)布時間:2025/3/15 HTML 27 豆豆
生活随笔 收集整理的這篇文章主要介紹了 高通量数据分析必备|基因组浏览器使用介绍 - 1 小編覺得挺不錯的,現(xiàn)在分享給大家,幫大家做個參考.

基因組瀏覽器是高通量測序分析的一個重要的可視化工具。相比于最終提供的表格,基因組瀏覽器可以提供更多的信息,如直觀展示突變位點、查看有無新轉(zhuǎn)錄本或新的可變剪接形式、查看peak的可信度、上下游基因、區(qū)域保守性、重復元件、蛋白結(jié)合motif等。

我們前面有測序數(shù)據(jù)可視化列舉了4個常用的高通量數(shù)據(jù)可視化工具,詳細介紹了IGV基因組瀏覽器可視化高通量測序數(shù)據(jù)和UCSC 基因組瀏覽器的安裝使用。

最近幾次將以華盛頓大學(DC)開發(fā)的EPGG基因組瀏覽器為主要工具 (目前主流瀏覽器之一,不同的功能更新分別發(fā)表于NBT, Nature method等雜志),介紹下基因組瀏覽器的基本展示內(nèi)容、各部分含義、使用方式等。

基因組瀏覽器都可以按照位置基因名字搜索,可進行局部放大和縮小。雖然每個軟件略有不同,但基本操作是通用的。點一點,拽一拽,就都能用了。初次接觸一個軟件,多一點耐心,多一點操作,其實沒那么難。

基因信息展示包含基因的轉(zhuǎn)錄方向信息 (箭頭),基因結(jié)構(gòu)信息 (CDS, UTR, intron),基因功能描述信息等。方向信息對我們識別轉(zhuǎn)錄起始位點啟動子區(qū)域和啟動子上的ChIP peak至關(guān)重要。

另外還有個功能,基因只在基因組占1%,瀏覽起來不方便,Juxtapose模式可以只顯示基因區(qū),其它區(qū)域隱藏,這樣截圖或瀏覽起來都更方便。

重復元件是我們做分析時需要關(guān)注的一個點,最近Cell文章發(fā)現(xiàn) LINE元件 (A LINE-1-Nucleolin Patnership Regulates Early Development and ESC Identity)是胚胎發(fā)育的關(guān)鍵。如果我們的數(shù)據(jù)能在某個重復元件上有特殊分布,也可能催生重要發(fā)現(xiàn)呢。

“峰圖”是最常見的展示形式,reads的分布有高有低,在基因組上形成層戀疊嶂的山峰狀。峰頂表示對應區(qū)域的表達、修飾或結(jié)合比較高。

除了峰形圖,也可以展示熱圖、線圖等。

數(shù)值Track支持的數(shù)據(jù)一般是bigWig格式,在不同瀏覽器之間通用。不同Track之間比較時需要先對數(shù)據(jù)做標準化,也需要設(shè)置同等大小的Y軸。數(shù)據(jù)可以進行一定程度的擬合,使得結(jié)果更清晰 (圖中的Smooth window)。

這個線圖常用于比較富集樣品和對照樣品,或比較不同樣品之間的表達量高低等。把2個Track放到一起展示,高低立見。UCSC genome browser也有類似功能,而且展示效果更好,我們前面也已提過。

EPGG特有的甲基化數(shù)據(jù)展示,給定每個位點測序深度,CG甲基化比例,CHH,CHG甲基化比例等。還可以在線過濾,篩選不同支持reads數(shù)的甲基化位點,更有動態(tài)性。是甲基化分析的必備神器。

染色體的三維結(jié)構(gòu)研究越來越多,用途也越來越大。關(guān)聯(lián)SNP位點的功能,尋找enhancer的靶基因,基因組區(qū)域互作,都可以通過Hi-C數(shù)據(jù)提供更多支持信息。EPGG可以用互作熱圖或loop連線兩種方式展示區(qū)域之間的互作。

互作熱圖的識別方式是:如果要看位點A和位點B之間是否有互作,只需在正負45度方向畫一條線,查看線是否有交點和交點處顏色強弱即可判斷。

還有圈圖形式,從宏觀展示某個位點與基因組其它區(qū)域的互作。

SNP位點展示及連鎖不平衡展示,這也是EPGG的特有功能。可視化與Hi-C染色體互作類似。

下一步將講一下EPGG的自帶數(shù)據(jù)和分析功能,以更方便使用。

訪問鏈接:http://epigenomegateway.wustl.edu/browser/

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總結(jié)

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