RNA测序为什么会出现?与基因表达芯片相比,RNA测序有什么特点?
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RNA测序为什么会出现?与基因表达芯片相比,RNA测序有什么特点?
小編覺得挺不錯(cuò)的,現(xiàn)在分享給大家,幫大家做個(gè)參考.
RNA測(cè)序也就是所謂的RNA-seq,通常指的是轉(zhuǎn)錄組測(cè)序,只測(cè)細(xì)胞中的轉(zhuǎn)錄組,所以數(shù)據(jù)相對(duì)少且簡(jiǎn)單。RNA測(cè)序不僅能檢測(cè)mRNA的轉(zhuǎn)錄,還能觀測(cè)到包括包括總RNA和小RNA(miRNA、tRNA和核糖體RNA)在內(nèi)不同尺度的RNA表達(dá)譜,相對(duì)于RNA測(cè)序,基因表達(dá)芯片測(cè)序結(jié)果的覆蓋面很窄,只能覆蓋染色體中1千多萬SNP中的常見等位基因的SNP(50萬到200萬)。
RNA測(cè)序(英語:RNA Sequencing,簡(jiǎn)稱RNA-Seq,也被稱為全轉(zhuǎn)錄物組鳥槍法測(cè)序:Whole Transcriptome Shotgun Sequencing[1],WTSS)是基于第二代測(cè)序技術(shù)的轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究方法:首先提取生物樣品的全部轉(zhuǎn)錄的RNA,然后反轉(zhuǎn)錄為c-DNA后進(jìn)行的二代高通量測(cè)序,在此基礎(chǔ)上進(jìn)行片段的重疊組裝,從而可得到一個(gè)個(gè)的轉(zhuǎn)錄本。進(jìn)而可以形成對(duì)該生物樣品當(dāng)前發(fā)育狀態(tài)的基因表達(dá)狀況的全局了解(globle)。如同樓上所說,RNA測(cè)序有很多優(yōu)勢(shì)。此外,若和下一階段的生物樣品的RNA-Seq轉(zhuǎn)錄組進(jìn)行比較,則可以得到全部的(在轉(zhuǎn)錄層面)基因表達(dá)的上調(diào)及下調(diào)--這就形成了表達(dá)譜,針對(duì)關(guān)鍵基因則可以形成你要想要的pathway的構(gòu)建。相較于一個(gè)靜態(tài)的染色體而言,細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)錄物組是一個(gè)處于不斷變化的動(dòng)態(tài)過程。隨著現(xiàn)在的下一代基因測(cè)序(NGS)技術(shù)的發(fā)展,使得可測(cè)得的DNA堿基覆蓋面增加且樣本輸出的吞吐量增大。有助于對(duì)細(xì)胞內(nèi)RNA轉(zhuǎn)錄物進(jìn)行測(cè)序,提供包括選擇性剪接的轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后的改變、基因融合、突變/SNPs以及基因表達(dá)量改變等細(xì)節(jié)。正因?yàn)镽NA測(cè)序可以檢測(cè)動(dòng)態(tài)過程,因而優(yōu)勢(shì)非常明顯。
RNA測(cè)序的優(yōu)勢(shì):數(shù)字化信號(hào):直接測(cè)定每個(gè)轉(zhuǎn)錄本片段序列,單核苷酸分辨率的精確度,同時(shí)不存在傳統(tǒng)微陣列雜交的熒光模擬信號(hào)帶來的交叉反應(yīng)和背景噪音問題。高靈敏度:能夠檢測(cè)到細(xì)胞中少至幾個(gè)拷貝的稀有轉(zhuǎn)錄本。全基因組分析:可以對(duì)任何物種進(jìn)行全基因組分析。無需預(yù)先設(shè)計(jì)特異性探針,因此無需了解物種基因信息,能夠直接對(duì)任何物種進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組分析。同時(shí)能夠檢測(cè)未知基因,發(fā)現(xiàn)新的轉(zhuǎn)錄本,并精確地識(shí)別可變剪切位點(diǎn)及cSNP,UTR區(qū)域。檢測(cè)范圍:高于6個(gè)數(shù)量級(jí)的動(dòng)態(tài)檢測(cè)范圍,能夠同時(shí)鑒定和定量稀有轉(zhuǎn)錄本和正常轉(zhuǎn)錄本。
RNA測(cè)序(英語:RNA Sequencing,簡(jiǎn)稱RNA-Seq,也被稱為全轉(zhuǎn)錄物組鳥槍法測(cè)序:Whole Transcriptome Shotgun Sequencing[1],WTSS)是基于第二代測(cè)序技術(shù)的轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究方法:首先提取生物樣品的全部轉(zhuǎn)錄的RNA,然后反轉(zhuǎn)錄為c-DNA后進(jìn)行的二代高通量測(cè)序,在此基礎(chǔ)上進(jìn)行片段的重疊組裝,從而可得到一個(gè)個(gè)的轉(zhuǎn)錄本。進(jìn)而可以形成對(duì)該生物樣品當(dāng)前發(fā)育狀態(tài)的基因表達(dá)狀況的全局了解(globle)。如同樓上所說,RNA測(cè)序有很多優(yōu)勢(shì)。此外,若和下一階段的生物樣品的RNA-Seq轉(zhuǎn)錄組進(jìn)行比較,則可以得到全部的(在轉(zhuǎn)錄層面)基因表達(dá)的上調(diào)及下調(diào)--這就形成了表達(dá)譜,針對(duì)關(guān)鍵基因則可以形成你要想要的pathway的構(gòu)建。相較于一個(gè)靜態(tài)的染色體而言,細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)錄物組是一個(gè)處于不斷變化的動(dòng)態(tài)過程。隨著現(xiàn)在的下一代基因測(cè)序(NGS)技術(shù)的發(fā)展,使得可測(cè)得的DNA堿基覆蓋面增加且樣本輸出的吞吐量增大。有助于對(duì)細(xì)胞內(nèi)RNA轉(zhuǎn)錄物進(jìn)行測(cè)序,提供包括選擇性剪接的轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后的改變、基因融合、突變/SNPs以及基因表達(dá)量改變等細(xì)節(jié)。正因?yàn)镽NA測(cè)序可以檢測(cè)動(dòng)態(tài)過程,因而優(yōu)勢(shì)非常明顯。
RNA測(cè)序的優(yōu)勢(shì):數(shù)字化信號(hào):直接測(cè)定每個(gè)轉(zhuǎn)錄本片段序列,單核苷酸分辨率的精確度,同時(shí)不存在傳統(tǒng)微陣列雜交的熒光模擬信號(hào)帶來的交叉反應(yīng)和背景噪音問題。高靈敏度:能夠檢測(cè)到細(xì)胞中少至幾個(gè)拷貝的稀有轉(zhuǎn)錄本。全基因組分析:可以對(duì)任何物種進(jìn)行全基因組分析。無需預(yù)先設(shè)計(jì)特異性探針,因此無需了解物種基因信息,能夠直接對(duì)任何物種進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組分析。同時(shí)能夠檢測(cè)未知基因,發(fā)現(xiàn)新的轉(zhuǎn)錄本,并精確地識(shí)別可變剪切位點(diǎn)及cSNP,UTR區(qū)域。檢測(cè)范圍:高于6個(gè)數(shù)量級(jí)的動(dòng)態(tài)檢測(cè)范圍,能夠同時(shí)鑒定和定量稀有轉(zhuǎn)錄本和正常轉(zhuǎn)錄本。
總結(jié)
以上是生活随笔為你收集整理的RNA测序为什么会出现?与基因表达芯片相比,RNA测序有什么特点?的全部內(nèi)容,希望文章能夠幫你解決所遇到的問題。
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