DNA碎片分析具体步骤是什么样子的?
生活随笔
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DNA碎片分析具体步骤是什么样子的?
小編覺得挺不錯的,現在分享給大家,幫大家做個參考.
從犯罪現場收集來的各種DNA證據(血液,頭發,精液等等大家都熟悉了)為的是能夠從中提取足夠多的DNA。根據能獲得的DNA的量不同,可能會采取不同的分析方法。建立DNA-Profile的基礎就是分析高度可變的重復序列,這種是在染色體上頻繁出現的“可變數目的重復序列 (VNTRs)[1] “,或者是”短重復序列 (STRs) [2] ”(算是VNTPs的一種),這些序列在不同人的身上以不同長度的組合出現,近親間會非常相似,但在無親緣關系的人之間幾乎不可能會相同。這就是鑒定的理論基礎。過程就是提取細胞核DNA,通過聚合酶鏈式反應 (PCR)[3] 對STR部位的片段進行指數級的擴增,因為之后的電泳會將這些片段按大小分離開來,所以總量必須夠大以保證分離之后得到的片段被檢測到。電泳的原理 @米叔 已經講了,記得在幾年前一個講座里聽過現在鑒證科用的都是以毛細管電泳[4]為基礎的儀器,就是可以在很細的導管里用高壓使片段分子迅速分離,而且包括加螢光染料最后檢測對比的過程都可以實現自動化。分離之后,通過同時比對多個STR位點,就會給出一個條帶圖譜,以及這樣的圖譜在整個種群中出現的幾率,然后從統計學上給出一個帶有相同圖譜的人出現的可能性。基本上如果對比8到15個這樣的位點,這個幾率就是幾百萬分之一。也就是說兩個沒有親緣關系的人幾乎不可能會有相同的STR圖譜。然后每個國家對建立和比對這種DNA-Profile都有不同的程序,在德國就是將取證得來的未知的DNA-Profile與已有罪犯及嫌疑人的數據庫對比,不過結果本身似乎也不能作為是否有罪的直接證據。另外也有其它方法來對DNA證據進行分析,比方使用線粒體DNA。線粒體DNA簡單來說就是一套除了我們通常所說的23對染色體基因組之外,存在于我們每個細胞的細胞器當中的獨立的DNA。它的特點的拷貝數量大,所以在不能獲得足夠生物組織樣本的情況下可以使用。據說世貿大樓災難里面的很多受難者都是通過這個方法確認身份的。
舉例說一下精子DNA碎片分析,其主要是通過精子懸液與瓊脂糖混合鋪于載玻片上,酸處理后溶解細胞去除核蛋白,染色,最后用熒光顯微鏡觀察。去除核蛋白后,精子染色質結構松散,DNA 環附著于殘留的核結構,形成光暈。
舉例說一下精子DNA碎片分析,其主要是通過精子懸液與瓊脂糖混合鋪于載玻片上,酸處理后溶解細胞去除核蛋白,染色,最后用熒光顯微鏡觀察。去除核蛋白后,精子染色質結構松散,DNA 環附著于殘留的核結構,形成光暈。
總結
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