腺病毒科（Adenoviridae）是一種中型大小的病毒，約90-100nm大，是一種無(wú)外套膜的二十面體雙股DNA病毒，有核衣殼。優(yōu)點(diǎn)有很多，如腺病毒載體轉(zhuǎn)基因效率高，體外實(shí)驗(yàn)通常接近100%的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率；可轉(zhuǎn)導(dǎo)不同類型的人組織細(xì)胞，不受靶細(xì)胞是否為分裂細(xì)胞所限；容易制得高滴度病毒載體，在細(xì)胞培養(yǎng)物中重組病毒滴度可達(dá)（10E+11）/ml；進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)并不整合到宿主細(xì)胞基因組，僅瞬間表達(dá)，安全性高。因而，腺病毒載體在基因治療臨床試驗(yàn)方面有了越來(lái)越多的應(yīng)用，成為繼逆轉(zhuǎn)錄病毒載體之后廣泛應(yīng)用且最具前景的病毒載體。

腺病毒載體具有點(diǎn)還是很多的，具體大致有以下幾點(diǎn)：宿主領(lǐng)域廣，尤其人類是Ad的自然宿主，而且不僅可以感染分裂期細(xì)胞，也可以感染非分裂期細(xì)胞；可獲得高病毒效價(jià)，其病毒滴度可達(dá)109-1011 CFU/ml，并且易于較長(zhǎng)期保存；病毒沒(méi)有包膜，不易被補(bǔ)體滅活，可直接體內(nèi)應(yīng)用；安全性好，重組體非常穩(wěn)定，未發(fā)現(xiàn)載體導(dǎo)入后重排，不整合入染色體DNA，不會(huì)引起腫瘤。

腺病毒載體的優(yōu)點(diǎn)1. 宿主范圍廣, 對(duì)人致病性低 腺病毒載體系統(tǒng)可廣泛用于人類及非人類蛋白的表達(dá)。腺病毒可感染一系列哺乳動(dòng)物細(xì)胞，因此在大多哺乳動(dòng)物細(xì)胞和組織中均可用來(lái)表達(dá)重組蛋白。特別需要指出的是：腺病毒具有嗜上皮細(xì)胞性，而人類的大多數(shù)的腫瘤就是上皮細(xì)胞來(lái)源的。另外，腺病毒的復(fù)制基因和致病基因均已相當(dāng)清楚，在人群中早已流行（70-80%成人體內(nèi)都有腺病毒的中和抗體存在）。人類感染野生型腺病毒后僅產(chǎn)生輕微的自限性癥狀，且病毒唑治療有效。2. 在增殖和非增殖細(xì)胞中感染和表達(dá)基因 逆轉(zhuǎn)錄病毒只能感染增殖性細(xì)胞，因此DNA轉(zhuǎn)染不能在非增殖細(xì)胞中進(jìn)行，而必須使細(xì)胞處于持續(xù)培養(yǎng)狀態(tài)。腺病毒則能感染幾乎所有的細(xì)胞類型，除了一些抗腺病毒感染的淋巴瘤細(xì)胞。腺病毒是研究原代非增殖細(xì)胞基因表達(dá)的最佳系統(tǒng)，它可以使轉(zhuǎn)化細(xì)胞和原代細(xì)胞中得到的結(jié)果直接進(jìn)行對(duì)比。3. 能有效進(jìn)行增殖，滴度高 腺病毒系統(tǒng)可產(chǎn)生1010到1011VP/ml，濃縮后可達(dá)1013VP/ml，這一特點(diǎn)使它非常適用于基因治療。4. 與人類基因同源 腺病毒載體系統(tǒng)一般應(yīng)用人類病毒作為載體，以人類細(xì)胞作為宿主，因此為人類蛋白進(jìn)行準(zhǔn)確的翻譯后加工和適當(dāng)?shù)恼郫B提供了一個(gè)理想的環(huán)境。大多數(shù)人類蛋白都可達(dá)到高水平表達(dá)并且具有完全的功能。5. 不整合到染色體中，無(wú)插入致突變性 逆轉(zhuǎn)錄病毒可隨機(jī)整合到宿主染色體，導(dǎo)致基因失活或激活癌基因。而腺病毒則除了卵細(xì)胞以外幾乎在所有已知細(xì)胞中都不整合到染色體中，因此不會(huì)干擾其它的宿主基因。在卵細(xì)胞中整合單拷貝病毒則是產(chǎn)生具有特定特征的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的一個(gè)較好的系統(tǒng)。6. 能在懸浮培養(yǎng)液中擴(kuò)增 293細(xì)胞可以適應(yīng)懸浮培養(yǎng)，這一調(diào)整可使病毒大量擴(kuò)增。大量事實(shí)證明懸浮293細(xì)胞可在1～20L的生物反應(yīng)器中表達(dá)重組蛋白。7. 能同時(shí)表達(dá)多個(gè)基因 這是第一個(gè)可以在同一細(xì)胞株或組織中用來(lái)設(shè)計(jì)表達(dá)多個(gè)基因的表達(dá)系統(tǒng)。最簡(jiǎn)單的方法是將含有兩個(gè)基因的雙表達(dá)盒插入腺病毒轉(zhuǎn)移載體中，或者用不同的重組病毒共轉(zhuǎn)染目的細(xì)胞株來(lái)分別表達(dá)一個(gè)蛋白。測(cè)定不同重組病毒的MOI比值可正確估計(jì)各重組蛋白的相對(duì)共表達(dá)情況。 正是由于具有以上一些優(yōu)點(diǎn)，腺病毒被極其廣泛地應(yīng)用于體外基因轉(zhuǎn)導(dǎo)、體內(nèi)接種疫苗、和基因治療等各個(gè)領(lǐng)域。

總結(jié)

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