補(bǔ)充一樓吧。除了上述的步驟，還包括變性前面的預(yù)變性和延伸后面的再延伸。具體設(shè)置的每個(gè)步驟的溫度和時(shí)間是依據(jù)你所用的酶和你的引物來設(shè)定的。變性時(shí)間5-10min,變性30s夠了，退火溫度要根據(jù)你的引物的退火溫度合理設(shè)置。延伸也是要看你擴(kuò)增的片段長度來定，再延伸一般5-10min.

PCR具體的基本反應(yīng)步驟一般有：變性，既將反應(yīng)系統(tǒng)加熱至95℃,使模板DNA完全變性成為單鏈，同時(shí)引物自身和引物之間存在的局部雙鏈也得以消除；退火， 將溫度下降至適宜溫度使引物與模板DNA退火結(jié)合；延伸， 將溫度升至72℃，DNA聚合酶以dNTP為底物催化DNA的合成反應(yīng)，按堿基配對與半保留復(fù)制原理，合成一條與模板DNA鏈相互補(bǔ)的新鏈。上述三個(gè)步驟稱為一個(gè)循環(huán)，經(jīng)多次循環(huán)后即可達(dá)到擴(kuò)增DNA片段的目的。

總結(jié)

以上是生活随笔為你收集整理的PCR的基本反应步骤有哪些？的全部內(nèi)容，希望文章能夠幫你解決所遇到的問題。

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