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PCR的基本反应步骤有哪些?

發布時間:2023/11/22 万象百科 51 博士
生活随笔 收集整理的這篇文章主要介紹了 PCR的基本反应步骤有哪些? 小編覺得挺不錯的,現在分享給大家,幫大家做個參考.
補充一樓吧。除了上述的步驟,還包括變性前面的預變性和延伸后面的再延伸。具體設置的每個步驟的溫度和時間是依據你所用的酶和你的引物來設定的。變性時間5-10min,變性30s夠了,退火溫度要根據你的引物的退火溫度合理設置。延伸也是要看你擴增的片段長度來定,再延伸一般5-10min.

PCR具體的基本反應步驟一般有:變性,既將反應系統加熱至95℃,使模板DNA完全變性成為單鏈,同時引物自身和引物之間存在的局部雙鏈也得以消除;退火, 將溫度下降至適宜溫度使引物與模板DNA退火結合;延伸, 將溫度升至72℃,DNA聚合酶以dNTP為底物催化DNA的合成反應,按堿基配對與半保留復制原理,合成一條與模板DNA鏈相互補的新鏈。上述三個步驟稱為一個循環,經多次循環后即可達到擴增DNA片段的目的。

總結

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