目前質粒抽提一般是利用堿裂解法，該方法基于染色體DNA與質粒DNA變性和復性差異從而實現抽提分離。開始時高pH使質粒DNA和染色體DNA變性，同時沉淀蛋白質。再將pH值調至中性，質粒DNA較小，很容易復性成雙鏈。而染色體DNA較大，不會復性，纏結成網狀不溶物質，從而可以通過離心除去。

實驗一ApaLI (178)P(BLA) ALPHA質粒DNA的提取、 質粒DNA的提取、酶切 DNA的提取 及瓊脂糖凝膠電泳ApaLI (2367)EcoRI (397) AvaI (413)XmaI (413) SmaI (415)APrpUC19BamHI (418) PstI (440)HindIII (448)P(LAC) ORI2686 bpApaLI (1121)一 實驗目的掌握堿裂解法分離質粒DNA的基本原理和操作要點。 的基本原理和操作要點。 掌握堿裂解法分離質粒 的基本原理和操作要點 了解限制性內切酶作用的原理、特點和酶切質粒 了解限制性內切酶作用的原理、特點和酶切質粒DNA的試驗方法 的試驗方法 學習瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA的方法和技術 的方法和技術 學習瓊脂糖凝膠電泳檢測二 實驗原理質粒是一種染色體外能夠穩定遺傳的因子， 質粒是一種染色體外能夠穩定遺傳的因子，具有雙鏈共價閉環結構的DNA分子。是染色體外小型（ 200kb）的共價、閉合、環狀的雙鏈DNA分 DNA分子。是染色體外小型（1-200kb）的共價、閉合、環狀的雙鏈DNA分 分子 DNAcccDNA），能自主復制并能穩定遺傳的遺傳因子。 ），能自主復制并能穩定遺傳的遺傳因子子（cccDNA），能自主復制并能穩定遺傳的遺傳因子。培養細菌使質粒擴增 三個基本步驟 收集和裂解細菌 分離和純化質粒DNA 分離和純化質粒DNA

總結

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