人工合成大片段基因第一步就是合成長(zhǎng)核苷酸鏈的問(wèn)題，因?yàn)楹塑账崾且粋€(gè)個(gè)加上去的，即使每一步得率都很高，但一旦長(zhǎng)了就沒(méi)有辦法。現(xiàn)在我們?cè)趇nvitrogen合成引物（單核苷酸鏈），單條在56個(gè)（好像？）核苷酸以下的一個(gè)價(jià)，56個(gè)以上的另一個(gè)價(jià)，最長(zhǎng)不能超過(guò)120個(gè)，這似乎就是目前用固相亞磷酰胺三酯法合成引物的極限了。因?yàn)榛蚪M是雙鏈的，我們可以通過(guò)合成互補(bǔ)的兩條單鏈退火得到需要的雙鏈，這樣得到的不過(guò)是一百來(lái)個(gè)堿基對(duì)的DNA雙鏈。而最小的有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的生物的基因組也有160kb之巨。為了得到更長(zhǎng)的DNA雙鏈，我們可以用分子生物學(xué)的工具來(lái)做到。比如，在模板存在的情況下，我們可以通過(guò)PCR的方法，使用高保真的聚合酶，一次性擴(kuò)增產(chǎn)生10kb以上的片段；我們還可以通過(guò)限制性內(nèi)切酶和連接酶的工具，將多個(gè)DNA片段連結(jié)上；我們也能通過(guò)使用quikchange誘變的方法對(duì)DNA序列進(jìn)行小范圍的修改；我們還能通過(guò)BAC、YAC等載體將得到的超長(zhǎng)片段在細(xì)菌或酵母內(nèi)保藏、擴(kuò)增。如果不考慮基因組的裝配，以現(xiàn)在的技術(shù)，我們是能夠獲得長(zhǎng)達(dá)一萬(wàn)kb的DNA雙鏈的，請(qǐng)看這貨的工作：JCVI: First Self-Replicating, Synthetic Bacterial Cell Constructed by J. Craig Venter Institute Researchers。基因合成無(wú)法做到像3D打印的原因是尺度不同，3D打印是在宏觀尺度上材料的構(gòu)筑，而基因合成是在分子尺度上的化學(xué)反應(yīng)，它們的原材料服從的物理規(guī)律不一樣。除非咱能得心應(yīng)手地操作單分子。如果我們硬要從一堆無(wú)機(jī)物，de novo做一個(gè)生命出來(lái)，俺不知道還有多遠(yuǎn)，不過(guò)樂(lè)觀估計(jì)是以十年為單位計(jì)算的。這個(gè)問(wèn)題可能是沒(méi)有意義的，因?yàn)橐袁F(xiàn)有的生物資源，我們似乎只用在它們的基礎(chǔ)上進(jìn)行修改、不斷地修改，就能夠滿足人類的需求了。而這樣的事情，不是有人在做么？此所謂：轉(zhuǎn)基因。

總結(jié)

以上是生活随笔為你收集整理的人工合成大片段基因的瓶颈是什么？的全部?jī)?nèi)容，希望文章能夠幫你解決所遇到的問(wèn)題。

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