原位PCR是Hasse等于1990年建立的技術(shù)，就是在組織細(xì)胞里進(jìn)行PCR反應(yīng)，它結(jié)合了具有細(xì)胞定位能力的原位雜交和高度特異敏感的PCR技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)，是細(xì)胞學(xué)科研與臨床診斷領(lǐng)域里的一項(xiàng)有較大潛力的新技術(shù)。原位PCR既能分辯鑒定帶有靶序列的細(xì)胞，又能標(biāo)出靶序列在細(xì)胞內(nèi)的位置，于分子和細(xì)胞水平上研究疾病的發(fā)病機(jī)理和臨床過(guò)程及病理的轉(zhuǎn)歸有重大的實(shí)用價(jià)值。原位PCR是原位雜交細(xì)胞定位和PCR的高靈敏度相結(jié)合的技術(shù)，使得靶基因檢測(cè)有了極大的改進(jìn)。此技術(shù)是在細(xì)胞（爬片、甩片或涂片）或組織（石蠟、冰凍切片）上直接對(duì)靶基因片段進(jìn)行擴(kuò)增，通過(guò)摻入標(biāo)記基團(tuán)直接顯色或結(jié)合原位雜交進(jìn)行檢測(cè)的方法。

原位PCR技術(shù)成功地將PCR技術(shù)和原位雜交技術(shù)結(jié)合起來(lái)，保持了兩項(xiàng)技術(shù)的優(yōu)勢(shì)又彌補(bǔ)了各自的不足。根據(jù)在擴(kuò)增反應(yīng)中所用的三磷酸核苷原料或引物是否標(biāo)記，原位PCR技術(shù)可分為直接法和間接法兩大類(lèi)，此外，還有反轉(zhuǎn)錄原位PCR技術(shù)等。?原位PCR技術(shù)的基本步驟包括標(biāo)本的制備。原位擴(kuò)增（PCR）及原位檢測(cè)等基本環(huán)節(jié)。

原位PCR是在單細(xì)胞或組織切片上對(duì)特異的核苷酸序列進(jìn)行原位PCR擴(kuò)增，再進(jìn)行DNA分子原位雜交以進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)基因(或特定DNA片段)的定位或檢出的技術(shù)。它是原位雜交的細(xì)胞定位技術(shù)與PCR的高靈敏度相結(jié)合的一種技術(shù)，使得靶基因的檢測(cè)技術(shù)有了極大的改進(jìn)。

總結(jié)

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