它的原理是采用一對兩種不同顏色熒光標(biāo)記的SNP位點(diǎn)特異TaqManMGB探針加一對PCR引物與樣品DNA進(jìn)行PCR反應(yīng)。兩種不同顏色熒光標(biāo)記的SNP位點(diǎn)特異TaqManMGB探針的堿基序列有一個不同,分別與SNP位點(diǎn)的不同等位基因互補(bǔ),可以識別特異性SNP位點(diǎn),通過對PCR反應(yīng)后熒光顏色的判定即可判定該位點(diǎn)的SNP基因型。該方法操作比常規(guī)PCR還要簡單,成功率高,可以一步完成,且全部試劑已商業(yè)化,采用384孔熒光定量PCR儀及終點(diǎn)法分析結(jié)果,其通量最大可至每天25萬個基因分型。該方法被認(rèn)為是未來基于SNP的基因診斷和個體化用藥分析臨床應(yīng)用的最可能采用的技術(shù)方法之一。缺點(diǎn)是每一個位點(diǎn)分型需要合成兩條熒光標(biāo)記的TaqManMGB探針,如果樣品數(shù)少于100例,分型成本就比較高。

總結(jié)

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