根據(jù)國(guó)際統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn): 1OD引物干粉約為33微克； 引物的摩爾數(shù)(μmol) =質(zhì)量數(shù) / 引物分子量 =(OD數(shù)×33)/引物分子量如您拿到1管2 OD的引物, 分子量是6565.3， 引物的摩爾數(shù)(μmol) =（2×33）/6565.3 ≈0.010μmol=10 nmol若您需要溶解為10μM (=10pmol/μl)的溶液，只需加入1 ml無菌ddH2O或10 mM pH7.5 TE緩沖液充分溶解即可。

方法如下：引物保存在高濃度的狀況下比較穩(wěn)定。引物一般配制成10-50pmol/ul。 溶解前需要核對(duì)合成報(bào)告單和引物標(biāo)簽上的引物OD數(shù)是否一致。一般情況下，將引物的濃度配制成50pmol/ul，加水的體積（微升）按下列方式計(jì)算：V (微升)= OD數(shù)（乘）33 *（乘）（乘）20000 / (除) 引物的分子量。引物的分子量可以從合成報(bào)告單上獲得。如果需要配制成其他濃度，按上述公式換算。注意：1 OD260= 33 ug/ml.

一般PCR反應(yīng)中的引物終濃度為0.2-1.0μmol/L。引物過多會(huì)產(chǎn)生錯(cuò)誤引導(dǎo)或產(chǎn)生引物二聚體, 過低則降低產(chǎn)量。利用紫外分光光度計(jì), 可精確計(jì)算引物濃度, 在1cm光程比色杯中,260nm下,引物濃度可按下式計(jì)算：X mol/L＝ OD260/ A(16000)+C(70000)+G(12000)+T(9600)X: 引物摩爾濃度,A、C、G、T: 引物中4種不同堿基個(gè)數(shù)。

可以將引物的濃度配制成50pmol/ul，加水的體積（微升）按下列方式計(jì)算：V (微升)= OD數(shù)×33 ×20000 / (除) 引物的分子量。引物的分子量可以從合成報(bào)告單上獲得。如果需要配制成其他濃度，按上述公式換算。

總結(jié)

以上是生活随笔為你收集整理的PCR中如何计算引物的浓度？的全部?jī)?nèi)容，希望文章能夠幫你解決所遇到的問題。

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