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基因的定位克隆策略是什么?

發(fā)布時(shí)間:2023/11/24 万象百科 56 博士
生活随笔 收集整理的這篇文章主要介紹了 基因的定位克隆策略是什么? 小編覺得挺不錯(cuò)的,現(xiàn)在分享給大家,幫大家做個(gè)參考.
這個(gè)大體上可以分成四個(gè)步驟。① 通過家系連鎖分析資料或染色體的微小缺失等數(shù)據(jù),確定基因在染色體上的位置;② 通過染色體步移(chromosome walking)、染色體區(qū)帶顯微切割等技術(shù),獲得基因所在區(qū)段的克隆重疊群(contig),繪制出更精細(xì)的染色體圖譜,這里包括用鄰近的標(biāo)記作為探針在基因組文庫中篩選重疊克隆;③ 確定含有候選基因的染色體片段;④ 從這些片段中進(jìn)一步篩選目的基因,并作突變檢測(cè)驗(yàn)證和功能分析。

定位克隆(Positional cloning) 根據(jù)遺傳連鎖分析,染色體步移將基因定位到染色體的一個(gè)具體位置上后不斷縮小篩選區(qū)域進(jìn)而克隆該基因,研究該基因的功能或抗性的生化機(jī)制,這樣一種策略叫定位克隆定位策略,其基本思路是通過連鎖分析(linkage analysis)原理進(jìn)行基因定位。若多態(tài)標(biāo)記與待定基因距離較遠(yuǎn),則它們?cè)谙蜃哟鷤鬟f時(shí)會(huì)發(fā)生自由分離,呈“連鎖平衡”;反之,則不發(fā)生自由分離,而呈現(xiàn)“共分離(co segregation)”現(xiàn)象,即“連鎖不平衡”。據(jù)此可在染色體上定位與某一DNA 標(biāo)記相連鎖的基因。

總結(jié)

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