基因的定位克隆策略是什么?
生活随笔
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基因的定位克隆策略是什么?
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這個大體上可以分成四個步驟。① 通過家系連鎖分析資料或染色體的微小缺失等數據,確定基因在染色體上的位置;② 通過染色體步移(chromosome walking)、染色體區帶顯微切割等技術,獲得基因所在區段的克隆重疊群(contig),繪制出更精細的染色體圖譜,這里包括用鄰近的標記作為探針在基因組文庫中篩選重疊克隆;③ 確定含有候選基因的染色體片段;④ 從這些片段中進一步篩選目的基因,并作突變檢測驗證和功能分析。
定位克隆(Positional cloning) 根據遺傳連鎖分析,染色體步移將基因定位到染色體的一個具體位置上后不斷縮小篩選區域進而克隆該基因,研究該基因的功能或抗性的生化機制,這樣一種策略叫定位克隆定位策略,其基本思路是通過連鎖分析(linkage analysis)原理進行基因定位。若多態標記與待定基因距離較遠,則它們在向子代傳遞時會發生自由分離,呈“連鎖平衡”;反之,則不發生自由分離,而呈現“共分離(co segregation)”現象,即“連鎖不平衡”。據此可在染色體上定位與某一DNA 標記相連鎖的基因。
定位克隆(Positional cloning) 根據遺傳連鎖分析,染色體步移將基因定位到染色體的一個具體位置上后不斷縮小篩選區域進而克隆該基因,研究該基因的功能或抗性的生化機制,這樣一種策略叫定位克隆定位策略,其基本思路是通過連鎖分析(linkage analysis)原理進行基因定位。若多態標記與待定基因距離較遠,則它們在向子代傳遞時會發生自由分離,呈“連鎖平衡”;反之,則不發生自由分離,而呈現“共分離(co segregation)”現象,即“連鎖不平衡”。據此可在染色體上定位與某一DNA 標記相連鎖的基因。
總結
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