如果溶解引物的水pH過低或污染了菌或核酸酶，會使引物降解。使用時沒有充分解凍混合，液體不均勻也可能會造成引物加入量不準確。建議分裝引物，避免反復凍溶。建議使用10mM Tris pH7.5緩沖液溶解引物，因為有些蒸餾水的pH值比較低（pH4-5）,引物在這種條件下不穩定。還有一種可能性是引物沒有問題，而是PCR使用材料特別是模板的質量與先前使用的不完全一致。

首先應安排實驗排除ＰＣＲ體系的問題，如純水，模板，酶，緩沖液。都沒問題的話，應該是引物降解或污染。可能出現問題的原因有：1. 反復凍融2. 在4度保存時間過長3. 被DNA酶污染重新找公司合成新的引物。

總結

以上是生活随笔為你收集整理的已经溶解的引物，为什么原先使用正常，而过一段时间再使用就不好了？的全部內容，希望文章能夠幫你解決所遇到的問題。

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