熒光原位雜交技術(shù)現(xiàn)已發(fā)展出自動化的分析技術(shù)，它是近年來細(xì)胞遺傳學(xué)的最重要進(jìn)展。熒光原位雜交技術(shù)技術(shù)和其它DNA雜交技術(shù)一樣，依靠標(biāo)記的單鏈DNA探針與互補的靶DNA序列結(jié)合，進(jìn)行靶基因的檢測。

熒光原位雜交技術(shù)（Fluorescence in situ hybridization, FISH）是根據(jù)已知微生物不同分類級別上種群特異的DNA序列，以利用熒光標(biāo)記的特異寡聚核苷酸片段作為探針，與環(huán)境基因組中DNA分子雜交，檢測該特異微生物種群的存在與豐度。它的基本原理是:如果被檢測的染色體或DNA纖維切片上的靶DNA與所用的核酸探針是同源互補的，二者經(jīng)變性-退火-復(fù)性，即可形成靶DNA與核酸探針的雜交體。將核酸探針的某一種核苷酸標(biāo)記上報告分子如生物素、地高辛，可利用該報告分子與熒光素標(biāo)記的特異親和素之間的免疫化學(xué)反應(yīng)，經(jīng)熒光檢測體系在鏡下對待測DNA進(jìn)行定性、定量或相對定位分析。

熒光原位雜交技術(shù)原理是將DNA探針用生物素和毛地黃毒苷等熒光染料標(biāo)記，然后將標(biāo)記的探針直接原位雜交到染色體或DNA纖維切片上，再用與熒光素分子偶聯(lián)的單克隆抗體與探針分子特異結(jié)合，通過熒光雜交信號來檢測DNA序列在染色體或DNA纖維上的定位、定性、相對定量分析。FISH技術(shù)已經(jīng)在細(xì)胞遺傳學(xué)、腫瘤生物學(xué)、基因定位、基因作圖、基因擴增、產(chǎn)前診斷及哺乳動物染色體進(jìn)化研究等領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。

總結(jié)

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