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荧光原位杂交技术具体内容是什么?

發布時間:2023/11/24 万象百科 61 博士
生活随笔 收集整理的這篇文章主要介紹了 荧光原位杂交技术具体内容是什么? 小編覺得挺不錯的,現在分享給大家,幫大家做個參考.
熒光原位雜交技術現已發展出自動化的分析技術,它是近年來細胞遺傳學的最重要進展。熒光原位雜交技術技術和其它DNA雜交技術一樣,依靠標記的單鏈DNA探針與互補的靶DNA序列結合,進行靶基因的檢測。

熒光原位雜交技術(Fluorescence in situ hybridization, FISH)是根據已知微生物不同分類級別上種群特異的DNA序列,以利用熒光標記的特異寡聚核苷酸片段作為探針,與環境基因組中DNA分子雜交,檢測該特異微生物種群的存在與豐度。它的基本原理是:如果被檢測的染色體或DNA纖維切片上的靶DNA與所用的核酸探針是同源互補的,二者經變性-退火-復性,即可形成靶DNA與核酸探針的雜交體。將核酸探針的某一種核苷酸標記上報告分子如生物素、地高辛,可利用該報告分子與熒光素標記的特異親和素之間的免疫化學反應,經熒光檢測體系在鏡下對待測DNA進行定性、定量或相對定位分析。

熒光原位雜交技術原理是將DNA探針用生物素和毛地黃毒苷等熒光染料標記,然后將標記的探針直接原位雜交到染色體或DNA纖維切片上,再用與熒光素分子偶聯的單克隆抗體與探針分子特異結合,通過熒光雜交信號來檢測DNA序列在染色體或DNA纖維上的定位、定性、相對定量分析。FISH技術已經在細胞遺傳學、腫瘤生物學、基因定位、基因作圖、基因擴增、產前診斷及哺乳動物染色體進化研究等領域得到了廣泛應用。

總結

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