噬菌体展示肽在脑部基因药物的应用情况如何?
生活随笔
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噬菌体展示肽在脑部基因药物的应用情况如何?
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噬菌體展示技術是將外源蛋白或多肽的DNA序列插入到噬菌體外殼蛋白結構基因的適當位置,使外源基因隨外殼蛋白而表達,同時外源蛋白隨噬菌體的重新組裝而展示到噬菌體表面。可以通過改變插入的DNA序列,建立噬菌體“文庫”,便可針對不同靶點展開目的蛋白或多肽的篩選。利用該技術篩選得到的多肽為噬菌體展示肽。噬菌體展示技術的一般過程分為:第一步,將靶點分子固定到固相支持物上,然后加入某一特定的噬菌體文庫與之溫育,使之展示能與靶點分子結合的多肽蛋白噬菌體結合在固相載體上;第二步,將未結合的噬菌體洗去;第三步,用競爭性洗脫或低pH緩沖液洗脫方法將結合的噬菌體洗脫下來,并使之感染細菌進行噬菌體擴增,用于下一輪的篩選,經過幾輪篩選循環,最終可富集得到能與靶點分子特異性結合的噬菌體。通過分析噬菌體展示多肽蛋白所對應的核苷酸序列和對應的氨基酸序列,即可獲得該多肽蛋白的分子信息。
利用噬菌體表面展示技術可以構建抗體庫、隨機肽庫、蛋白質突變體庫和cDNA文庫.從而廣泛用于單克隆抗體的篩選、先導化合物的篩選、疫苗的研制,改造和提高蛋白類藥物、酶和抗體的生物學和免疫學屬性,尤其是在抗原表位分析、受體與配體結合位點確定等分子問識別機制的研究方面,具有廣闊的應用前景。
利用噬菌體表面展示技術可以構建抗體庫、隨機肽庫、蛋白質突變體庫和cDNA文庫.從而廣泛用于單克隆抗體的篩選、先導化合物的篩選、疫苗的研制,改造和提高蛋白類藥物、酶和抗體的生物學和免疫學屬性,尤其是在抗原表位分析、受體與配體結合位點確定等分子問識別機制的研究方面,具有廣闊的應用前景。
總結
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