有了解基因治疗的第三代慢病毒载体的么?
生活随笔
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有了解基因治疗的第三代慢病毒载体的么?
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第三代慢病毒載體進一步做了些安全方面的改進,如刪除了U3區的3′LTR和tat基因。在載體質粒上插入了cPPT(增加基因表達水平)及WPRE(增加感染滴度),在一個包裝載體中插入腺病毒VA基因以增加感染滴度;同時在整個系統載體的多個部分做了一些基因的優化或刪減和插入以增加病毒的安全性。經過這樣的優化,最新一代慢病毒表達系統的包裝容量增大到10kb,在應用上更廣泛;其感染細胞的滴度及外源基因的表達水平均提高,這也在一定程度上彌補了慢病毒在基因治療領域內的不足;由于對整個慢病毒系統的多層面改造,降低了載體間的同源率和重組機率,更安全。
與“簡單型”逆轉錄病毒不同的是,慢病毒由于存在輔助蛋白和調控蛋白,其載體改造涉及更多的對這些反式作用因子的去除以及相應的順式作用元件的改造。第三代慢病毒載體去除了對Tat和Rev蛋白因子的依賴作用。通過將5’LTR中的U3區替換成CMV,可以消除對Tat的依賴;通過對gag-pol編碼基因的密碼子進行優化,可以解除對Rev的依賴。
與“簡單型”逆轉錄病毒不同的是,慢病毒由于存在輔助蛋白和調控蛋白,其載體改造涉及更多的對這些反式作用因子的去除以及相應的順式作用元件的改造。第三代慢病毒載體去除了對Tat和Rev蛋白因子的依賴作用。通過將5’LTR中的U3區替換成CMV,可以消除對Tat的依賴;通過對gag-pol編碼基因的密碼子進行優化,可以解除對Rev的依賴。
總結
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