基因工程酵母的创建过程是怎样的?用途有哪些方面?
生活随笔
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基因工程酵母的创建过程是怎样的?用途有哪些方面?
小編覺得挺不錯的,現在分享給大家,幫大家做個參考.
有一項最近的研究報道,可用一種基因工程酵母生產阿片類止痛藥:美國斯坦福大學的生物工程學家使用來自罌粟和一種細菌的5個基因(3個基因來自罌粟,另外2個基因來自生存于罌粟莖干的該細菌)創建了一種基因工程酵母,該酵母可從其前體細胞中生物合成出鴉片。這種工程化酵母生產的鴉片分子等同于從罌粟中生產的天然和半合成鴉片藥物。這或可成為這些必要藥物的一種替代來源。研究人員表示:“我們現在非常接近以一種排除罌粟種植需要的方式來復制整個鴉片生產過程,這將允許我們確實地產生必要的藥物(如嗎啡、氧可酮),同時也可降低這類藥物被轉移至非法用途的可能性。”
酵母基因工程菌的構建過程:1.目的基因的獲取: 獲取目的基因是實施基因工程的第一步,有三種方法提取目的基因。(1)鳥槍法(2)化學合成法(3)用 PCR 技術擴增技術提取。2.選擇合適的載體并插入目的基因: 基因表達載體的構建,即目的基因與運載體結合。是實施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。 3.將目的基因導入酵母菌即受體細胞內:目的基因的片段與運載體在生物體外連接形成重組 DNA 分子后。用人工方法使體外重組的 DNA 分子轉移到受體細胞,主要是借鑒細菌或病毒侵染細胞的途徑。4.將重組 DNA 分子引入受體細胞中進行擴增:重組的 DNA 分子進入細胞內就會 大量擴增。5.目的基因的監測與鑒定:運用 DNA 分子雜交技術來檢測目的基因, 分子雜交技術檢測 mRNA, 抗原抗體雜交技術檢測蛋白質。酵母基因工程菌在食品領域中的應用1.面包酵母的應用2. 葡萄酒酵母的應用3. 釀酒酵母的應用等
構建來說的話,其實最主要的方式還是誘變和質粒導入整合基因組。應用的話最實在的還是產品擴大~
在基因工程中,酵母菌常作為受體細胞。感受態畢氏酵母的制備如下:1、接種Pachia pastoris到50ml YPD培養基中,30℃搖菌過夜(約24~28h)培養到OD值為0.8~1.0(約108 Cells/ml);2、收獲細胞,用25ml無菌水洗滌 一次,室溫下1500g離心10min;3、重懸細胞 于1ml 100mM LiCl溶液中,將懸液轉入1.5ml離心管 ;4、離心機最大速度離心15秒沉淀菌體,重懸菌體于400ul 100mM LiCl溶液中;5、按50ul/管分裝,立即進行轉化;注:不要將感受態酵母菌冰浴;酵母菌為真核細胞,具有多種細胞器,所以在用于生產需加工分泌的蛋白質時有很大優勢。比如疫苗,藥物等。酵母感受態細胞制備可以:(1)用于建立酵母轉化體系;(2)用于酵母表達系統構建;(3)用于酵母其他分子生物學研究。
酵母基因工程菌的構建過程:1.目的基因的獲取: 獲取目的基因是實施基因工程的第一步,有三種方法提取目的基因。(1)鳥槍法(2)化學合成法(3)用 PCR 技術擴增技術提取。2.選擇合適的載體并插入目的基因: 基因表達載體的構建,即目的基因與運載體結合。是實施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。 3.將目的基因導入酵母菌即受體細胞內:目的基因的片段與運載體在生物體外連接形成重組 DNA 分子后。用人工方法使體外重組的 DNA 分子轉移到受體細胞,主要是借鑒細菌或病毒侵染細胞的途徑。4.將重組 DNA 分子引入受體細胞中進行擴增:重組的 DNA 分子進入細胞內就會 大量擴增。5.目的基因的監測與鑒定:運用 DNA 分子雜交技術來檢測目的基因, 分子雜交技術檢測 mRNA, 抗原抗體雜交技術檢測蛋白質。酵母基因工程菌在食品領域中的應用1.面包酵母的應用2. 葡萄酒酵母的應用3. 釀酒酵母的應用等
構建來說的話,其實最主要的方式還是誘變和質粒導入整合基因組。應用的話最實在的還是產品擴大~
在基因工程中,酵母菌常作為受體細胞。感受態畢氏酵母的制備如下:1、接種Pachia pastoris到50ml YPD培養基中,30℃搖菌過夜(約24~28h)培養到OD值為0.8~1.0(約108 Cells/ml);2、收獲細胞,用25ml無菌水洗滌 一次,室溫下1500g離心10min;3、重懸細胞 于1ml 100mM LiCl溶液中,將懸液轉入1.5ml離心管 ;4、離心機最大速度離心15秒沉淀菌體,重懸菌體于400ul 100mM LiCl溶液中;5、按50ul/管分裝,立即進行轉化;注:不要將感受態酵母菌冰浴;酵母菌為真核細胞,具有多種細胞器,所以在用于生產需加工分泌的蛋白質時有很大優勢。比如疫苗,藥物等。酵母感受態細胞制備可以:(1)用于建立酵母轉化體系;(2)用于酵母表達系統構建;(3)用于酵母其他分子生物學研究。
總結
以上是生活随笔為你收集整理的基因工程酵母的创建过程是怎样的?用途有哪些方面?的全部內容,希望文章能夠幫你解決所遇到的問題。
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