转基因食品检测的方法有哪些?
生活随笔
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转基因食品检测的方法有哪些?
小編覺得挺不錯的,現在分享給大家,幫大家做個參考.
如果僅看表型的話,是挺難區分轉基因食品和非轉基因食品的差異的。而目前采用的轉基因成分檢測方法包括核酸檢測和蛋白質檢測,前者主要有定性PCR、定量PCR、印跡法和基因芯片技術,后者主要有ELISA 和Western 雜交。
轉基因食品檢測方法有:1、PCR定性篩選檢測方法植物細胞轉入的基因成分一般包括啟動子 (promotor)、報告基因(reportergene)、目的基因(targetgene)和終止子(terminator),其中啟動子和終止子為表達目的基因所必需。目前,轉基因植物所采用的啟動子主要為來源于花椰菜花葉病毒的Camv35s啟動子、根瘤農桿菌的nos啟動子及玄參花葉病毒的 FMV35s啟動子;廣泛應用的終止子分別來源于根瘤農桿菌的nos終止子、花椰菜花葉病毒的camv終止子以及新霉素磷酸轉移酶NptII終止子。針對這些基因的PCR擴增可涵蓋95%的現有的轉基因植物的需要。2、實時熒光定量PCR法實時熒光PCR技術有效地解決了傳統定量只能終點檢測的局限,實現了每一輪循環均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,可對整個PCR進程的實時監測。此外,實時熒光PCR采用閉管分析,無需電泳等PCR后處理步驟,能有效消除核酸的交叉污染。3、基因芯片檢測法當今應用于轉基因食品檢測的前沿技術當屬基因芯片技術,其實質就是高度集成化的反向斑點雜交技術。探針分子固定在載體上,待測基因經過PCR、末端標記等操作,成為標記有熒光染料或同位素的核酸分子,然后與固定的探針雜交。依據標記方法的不同,通過放射自顯影、激光共聚焦顯微鏡或CCD相機讀出每個斑點信號的強度,計算機對雜交信號進行處理,得到雜交譜。4、多重連接依賴的探針擴增(MLPA)此方法是轉基因多重定量檢測的最新進展,最初是由荷蘭的Dr.SchoutenJP于2002年發表的應用于醫學檢測目的高度靈敏的相對定量技術。它是利用簡單的雜交、連接、PCR擴增反應,于單一反應管內同時檢測最多40個不同的核苷酸序列的拷貝數變化。具體可參考:http://www.feedtrade.com.cn/te ... .html
要測試食品是否含有經過基因改造的成份,或是某農作物是否經過基因改造,是要有兩個方法: 方法(1):找出是否有外來的基因或DNA方法(2)找出是否有處來的蛋白質。 在歐洲大部份實驗室,皆用方法一為主,但亦有數間實驗是基于一種稱為PCR的技術(PCR polymerase chain reaction).此技術主要能找出樣本內是否有外來基因。從使外來基因只占樣本的很少量,此技術亦能精確找出。現時的測試有兩類,一是專門找出樣本是否含有特定的基因改造成份,例如孟山都的Roundup Teady大豆。另外,亦可一次過測試通常用于基因改造食物的幾種基因成份,以便知悉樣本是經過基因改造。
轉基因產品(GMOs)是通過基因重組技術獲得的基因改良生物及其加工產品。對轉基因產品,用轉基因產品定性檢測方法(qualitative detection)對樣品中轉基因成分進行檢測,以判定該樣品是否為轉基因產品。1.實時熒光PCR法是目前最有發展前途的定量檢測方法,也是目前最適合出入境檢驗檢疫的檢測技術之一。所謂實時熒光定量PCR技術,是指在PCR反應體系中加入熒光集團,利用熒光信號積累,實時監測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。該方法可以有效提高檢測的準確性和靈敏度。它既能做定性檢測,加入標準品也能做定量檢測。 2.酶聯檢測方法,應稱作酶聯免疫吸附測定,是把抗原及抗體的免疫反應和酶的高效催化反應有機地結合而發展起來的、用酶作為標記物或指示劑進行抗原或抗體定性和定量測定的綜合技術。試紙條檢測方法也是轉基因產品抗血清檢測方法。這兩種方法是中國與美國谷物化學家協會(AACC)聯合研究的。中方主要承擔轉基因玉米和大豆兩個品種的抗血清特異性、靈敏度以及定量檢測的研究內容。目前,這兩種方法已上升為ISO標準。
這個可以從轉基因生物的特征出發,轉基因生物的特征是含有外源基岡和表現出導人基因的性狀,因此轉基因產品的檢測方法主要有三種:①核酸檢測方法;②蛋白質檢測方法;③酶活性檢測方法。
目前對于外源基因的檢測主要是通過對轉入的外源基因進行擴增,然后進行紫外或熒光檢測。還有基因芯片,巢式pcr等也都是對外源基因的檢測,再有就是外源蛋白質的檢測方法,主要有蛋白印記法、酶聯免疫吸附試驗等
轉基因食品檢測方法有:1、PCR定性篩選檢測方法植物細胞轉入的基因成分一般包括啟動子 (promotor)、報告基因(reportergene)、目的基因(targetgene)和終止子(terminator),其中啟動子和終止子為表達目的基因所必需。目前,轉基因植物所采用的啟動子主要為來源于花椰菜花葉病毒的Camv35s啟動子、根瘤農桿菌的nos啟動子及玄參花葉病毒的 FMV35s啟動子;廣泛應用的終止子分別來源于根瘤農桿菌的nos終止子、花椰菜花葉病毒的camv終止子以及新霉素磷酸轉移酶NptII終止子。針對這些基因的PCR擴增可涵蓋95%的現有的轉基因植物的需要。2、實時熒光定量PCR法實時熒光PCR技術有效地解決了傳統定量只能終點檢測的局限,實現了每一輪循環均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,可對整個PCR進程的實時監測。此外,實時熒光PCR采用閉管分析,無需電泳等PCR后處理步驟,能有效消除核酸的交叉污染。3、基因芯片檢測法當今應用于轉基因食品檢測的前沿技術當屬基因芯片技術,其實質就是高度集成化的反向斑點雜交技術。探針分子固定在載體上,待測基因經過PCR、末端標記等操作,成為標記有熒光染料或同位素的核酸分子,然后與固定的探針雜交。依據標記方法的不同,通過放射自顯影、激光共聚焦顯微鏡或CCD相機讀出每個斑點信號的強度,計算機對雜交信號進行處理,得到雜交譜。4、多重連接依賴的探針擴增(MLPA)此方法是轉基因多重定量檢測的最新進展,最初是由荷蘭的Dr.SchoutenJP于2002年發表的應用于醫學檢測目的高度靈敏的相對定量技術。它是利用簡單的雜交、連接、PCR擴增反應,于單一反應管內同時檢測最多40個不同的核苷酸序列的拷貝數變化。具體可參考:http://www.feedtrade.com.cn/te ... .html
要測試食品是否含有經過基因改造的成份,或是某農作物是否經過基因改造,是要有兩個方法: 方法(1):找出是否有外來的基因或DNA方法(2)找出是否有處來的蛋白質。 在歐洲大部份實驗室,皆用方法一為主,但亦有數間實驗是基于一種稱為PCR的技術(PCR polymerase chain reaction).此技術主要能找出樣本內是否有外來基因。從使外來基因只占樣本的很少量,此技術亦能精確找出。現時的測試有兩類,一是專門找出樣本是否含有特定的基因改造成份,例如孟山都的Roundup Teady大豆。另外,亦可一次過測試通常用于基因改造食物的幾種基因成份,以便知悉樣本是經過基因改造。
轉基因產品(GMOs)是通過基因重組技術獲得的基因改良生物及其加工產品。對轉基因產品,用轉基因產品定性檢測方法(qualitative detection)對樣品中轉基因成分進行檢測,以判定該樣品是否為轉基因產品。1.實時熒光PCR法是目前最有發展前途的定量檢測方法,也是目前最適合出入境檢驗檢疫的檢測技術之一。所謂實時熒光定量PCR技術,是指在PCR反應體系中加入熒光集團,利用熒光信號積累,實時監測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。該方法可以有效提高檢測的準確性和靈敏度。它既能做定性檢測,加入標準品也能做定量檢測。 2.酶聯檢測方法,應稱作酶聯免疫吸附測定,是把抗原及抗體的免疫反應和酶的高效催化反應有機地結合而發展起來的、用酶作為標記物或指示劑進行抗原或抗體定性和定量測定的綜合技術。試紙條檢測方法也是轉基因產品抗血清檢測方法。這兩種方法是中國與美國谷物化學家協會(AACC)聯合研究的。中方主要承擔轉基因玉米和大豆兩個品種的抗血清特異性、靈敏度以及定量檢測的研究內容。目前,這兩種方法已上升為ISO標準。
這個可以從轉基因生物的特征出發,轉基因生物的特征是含有外源基岡和表現出導人基因的性狀,因此轉基因產品的檢測方法主要有三種:①核酸檢測方法;②蛋白質檢測方法;③酶活性檢測方法。
目前對于外源基因的檢測主要是通過對轉入的外源基因進行擴增,然后進行紫外或熒光檢測。還有基因芯片,巢式pcr等也都是對外源基因的檢測,再有就是外源蛋白質的檢測方法,主要有蛋白印記法、酶聯免疫吸附試驗等
總結
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