肺结核病菌的检测方法有哪些?各有什么优势?
生活随笔
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肺结核病菌的检测方法有哪些?各有什么优势?
小編覺得挺不錯的,現(xiàn)在分享給大家,幫大家做個參考.
樓上表述的很全面。最常用的方法應(yīng)該是做PPD(結(jié)核菌素試驗):結(jié)核菌素試驗注射后72小時看結(jié)果,主要測量硬結(jié)的直徑,小于5mm為陰性,5-9mm為弱陽性(提示結(jié)核菌感染或非結(jié)核性分支桿菌感染),10-19mm為陽性反應(yīng),20mm以上或局部發(fā)生水泡與壞死者為強陽性反應(yīng)。要注意的是,有下列情況存在時,結(jié)核菌素試驗也可能呈現(xiàn)陰性反應(yīng):①初次感染結(jié)核桿菌8周內(nèi),由于機體的BT反應(yīng)尚未建立,結(jié)核菌素試驗可出現(xiàn)陰性結(jié)果。②當機體免疫功能低下或受抑制時,如嚴重營養(yǎng)不良、重癥結(jié)核、腫瘤、HIV感染、麻疹、百日咳、猩紅熱、重度脫水、重度水腫等,可呈假陰性反應(yīng)。③使用糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑者,結(jié)核菌素反應(yīng)也可暫時消失。④某些老年人的結(jié)核菌素試驗結(jié)果經(jīng)常為陰性。
我們在醫(yī)院檢查結(jié)核病的步驟一般是:1、第一懷疑病癥:患兒頸部、腋下,腹股溝等部位的淋巴結(jié)有輕度腫大;肺部檢查,很少有異常發(fā)現(xiàn);心率較快,肝脾也可輕度腫大。,可懷疑為結(jié)核病癥狀。 2、第二X線檢查:普通X線檢查分透視和折片兩種方式。透視可以幫助觀察一些不易發(fā)現(xiàn)部位的閏灶,如心臟后,肺門等處的病變;幫助確定病變的具體位置;而拍片實際上就是把透視所看到的景象用X線膠片保留下來,供醫(yī)生更仔細地觀察,還可以用來了解病情變化的情況。目前CT已經(jīng)廣泛應(yīng)用,它可以發(fā)現(xiàn)地些隱匿性病灶,即普通X線檢查不能或難以顯示的病灶,并且還可對病變性質(zhì)鑒別起重要的作用。3、第三項檢查是結(jié)核菌素試驗,是應(yīng)用結(jié)核菌素進行皮膚試驗來測定機體對結(jié)核分枝桿菌是否能引起超敏反應(yīng)的一種試驗,是診斷小兒結(jié)核病比較有價值的一項檢查4、第四實驗室檢查:主要有以下幾個方面:①細菌學(xué)診斷;常用的有涂片栓菌和結(jié)核菌培養(yǎng)兩種方法,可用痰液,胃液,腦站脊液進行檢查,結(jié)核菌的檢出是診斷結(jié)核病最有力的證據(jù)。②結(jié)核菌的基因診斷:主要有聚合酶鏈反應(yīng)(pcr),核酸指印技術(shù)等方法,這一類檢測方法的特點是快速、靈敏,特異性強。③免疫學(xué)診斷:包括結(jié)合菌抗原和抗結(jié)合抗體的檢查,也是一種快速、簡便有價值的實驗室輔助檢查 作為一種補充,肺結(jié)核既然由結(jié)核菌引起,就應(yīng)該可以使用結(jié)核菌檢測方法,主要有三種大類檢測法:細菌學(xué)、免疫學(xué)、分子生物學(xué)。 傳統(tǒng)實驗室常見的結(jié)核菌細菌學(xué)檢測方法有如下5種,但該傳統(tǒng)方法的準確率較低。 (1)痰涂片鏡檢法:是全世界的結(jié)核病實驗室外都在使用的最基本的細菌學(xué)檢查方法,其特點是簡單、快速和價廉,當天出結(jié)果,但無法辨別死菌活菌;敏感性低,通常需5000-10000條菌/ml才能夠得到陽性結(jié)果;特異性差,各種抗酸桿菌均可著色,需要通過進一步試驗才可確定是否為結(jié)核菌,有關(guān)這一方法的改進研究和評價很多,但由于檢測原理的限制,不可能出現(xiàn)突破性的進展。 ?。?)痰結(jié)核菌常規(guī)培養(yǎng)法:是鑒定死菌活菌的可靠方法,被譽為“黃金標準”。缺點是時間長,需求周才能報出結(jié)果,且敏感性低,涂片陽性標本只有約80%培養(yǎng)陽性;特異性差,各種分枝桿菌均可生長,需結(jié)合藥物敏感性試驗和分枝桿菌菌種鑒定,才可確定是否為結(jié)核菌。 ?。?)藥物敏感性試驗:用于鑒定結(jié)核菌對抗菌素結(jié)核藥物的敏感性水平。這項試驗通常是在痰結(jié)核菌培養(yǎng)的基礎(chǔ)上進行的,故需時更長。 ?。?)分枝桿菌菌種鑒定:是根據(jù)不同分枝桿菌的理化特性,以生物化學(xué)的方法為主。醫(yī).學(xué)教育網(wǎng)搜集整理可以精確地鑒定分枝桿菌的不同菌種,但操作復(fù)雜,且個別試驗使用的藥品,有一定的危險性。 ?。?)痰結(jié)核菌快速培養(yǎng)系統(tǒng):20世紀70年代發(fā)展的一種新的結(jié)核病細菌學(xué)檢查方法——痰結(jié)核菌快速培養(yǎng)、藥敏系統(tǒng)。該方法將陽性檢出時間較L-J法明顯縮短,從常規(guī)培養(yǎng)的8周縮短到3-14d,且具有操作簡便、自動化強、靈敏度高等優(yōu)點,在結(jié)核病的細菌學(xué)診斷中起到了重要作用,促進了結(jié)核病細菌學(xué)診斷的發(fā)展。主要問題是儀器與試劑的價格昂貴,難以廣泛應(yīng)用。 ** 常見的分子生物學(xué)檢測法**:采用TaqMan探針熒光聚合酶鏈式反應(yīng)技術(shù)原理,可在1天內(nèi)完成臨床樣品處理、核酸提取和熒光PCR檢測方法,具有快速簡便,特異性強、敏感度高的特點,主要用于早期確診。 免疫學(xué)診斷:包括結(jié)合菌抗原和抗結(jié)合抗體的檢查,也是一種快速、簡便有價值的實驗室輔助檢查。 其他檢查1、纖維支氣管鏡檢查:可以直接觀察或間接判斷支氣管、肺內(nèi)病變,并且有活組織檢查、灌洗、錄像、拍攝氣管內(nèi)照片等功能,對于診斷和鑒別診斷特別有用。肺部X線檢查不但可早期發(fā)現(xiàn)肺結(jié)核,而且可對病兆的部位、范圍、性質(zhì)、發(fā)展情況和效果作出診斷。
肺結(jié)核病由結(jié)核分枝桿菌引起,結(jié)核分枝桿菌(M.tuberculosis),俗稱結(jié)核桿菌,是引起結(jié)核病的病原菌,可侵犯全身各器官,以肺結(jié)核為最多見。結(jié)核分枝桿菌檢測方法主要有:一、結(jié)核菌素試驗結(jié)核菌素試驗是應(yīng)用結(jié)核菌素進行皮膚試驗來測定機體對結(jié)核分枝桿菌是否能引起超敏反應(yīng)的一種試驗。二、結(jié)核菌γ干擾素釋放試驗細胞免疫介導(dǎo)的結(jié)核菌γ干擾素釋放試驗(T-cell interferon gamma release assays,TIGRA,又稱IFNGRA或GRA)是近年來采用酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)或酶聯(lián)免疫斑點(ELISPOT)法定量檢出受檢者全血或外周血單個核細胞對結(jié)核分枝桿菌特異性抗原的IFN-γ檢測釋放反應(yīng),用于結(jié)核菌潛伏感染的診斷。IFN-γ為Thl細胞分泌的一種細胞因子,不但能夠反映機體結(jié)核的Thl細胞免疫情況,還與體內(nèi)結(jié)核菌的抗原含量密切相關(guān)。被結(jié)核分枝桿菌抗原致敏的T細胞再遇到同類抗原時能產(chǎn)生高水平的IFN-γ,因此被用于結(jié)核潛伏感染的診斷。三、微生物學(xué)檢查法1.標本標本的選擇根據(jù)感染部位??扇√?、支氣管灌洗液、尿、糞、腦脊液或胸、腹水。其他肺外感染可取血或相應(yīng)部位分泌液或組織細胞。2.直接涂片鏡檢3.濃縮集菌4.分離培養(yǎng)將經(jīng)中和集菌材料接種于固體培養(yǎng)基,器皿口加橡皮塞于37℃培養(yǎng),每周觀察1次。結(jié)核分枝桿菌生長緩慢,一般需2~4周長成肉眼可見的落菌。液體培養(yǎng)可將集菌材料滴加于含血清的培養(yǎng)液,則可于1~2周在管底見有顆粒生長。取沉淀物作涂片,能快速獲得結(jié)果,并可進一步作生化、藥敏等測定和區(qū)分結(jié)核分枝桿菌與非結(jié)核分枝桿菌。國內(nèi)學(xué)者已證明結(jié)核分枝桿菌L型可存在于血細胞內(nèi)或粘附于細胞表面。這種患者往往血沉加快,用低滲鹽水溶血后立即接種高滲結(jié)核分枝桿菌L型培養(yǎng)基能提高培養(yǎng)陽性率。5.動物試驗將集菌后的材料注射于豚鼠腹股溝皮下,3~4周后若局部淋巴結(jié)腫大,結(jié)核菌素試驗陽轉(zhuǎn),即可進行解剖。觀察肺、肝、淋巴結(jié)等器官有無結(jié)核病變,并作形態(tài)、培養(yǎng)等檢查。若6~8周仍不見發(fā)病,也應(yīng)進行解剖檢查。四、快速診斷法目前已將多聚酶鏈反應(yīng)(PCR)擴增技術(shù)應(yīng)用于結(jié)核分枝桿菌DNA鑒定,每ml中只需含幾個細菌即可獲得陽性,且1-2d得出結(jié)果。操作中需注意實驗器材的污染問題,以免出現(xiàn)假陽性。又細菌L型由于缺壁并有代償性細胞膜增厚,而一般常用的溶菌酶不能使細胞膜破裂釋出DNA,以致造成PCR假陰性。用組織磨碎器充分研磨使細胞破裂后,則可出現(xiàn)陽性。目前有條件的單位使用BACTEC法,以含14C棕櫚酸作碳源底物的7H12培養(yǎng)基,測量在細菌代謝過程中所產(chǎn)生的14C量推算出標本中是否有抗酸桿菌,5~7d就可出報告。
我們在醫(yī)院檢查結(jié)核病的步驟一般是:1、第一懷疑病癥:患兒頸部、腋下,腹股溝等部位的淋巴結(jié)有輕度腫大;肺部檢查,很少有異常發(fā)現(xiàn);心率較快,肝脾也可輕度腫大。,可懷疑為結(jié)核病癥狀。 2、第二X線檢查:普通X線檢查分透視和折片兩種方式。透視可以幫助觀察一些不易發(fā)現(xiàn)部位的閏灶,如心臟后,肺門等處的病變;幫助確定病變的具體位置;而拍片實際上就是把透視所看到的景象用X線膠片保留下來,供醫(yī)生更仔細地觀察,還可以用來了解病情變化的情況。目前CT已經(jīng)廣泛應(yīng)用,它可以發(fā)現(xiàn)地些隱匿性病灶,即普通X線檢查不能或難以顯示的病灶,并且還可對病變性質(zhì)鑒別起重要的作用。3、第三項檢查是結(jié)核菌素試驗,是應(yīng)用結(jié)核菌素進行皮膚試驗來測定機體對結(jié)核分枝桿菌是否能引起超敏反應(yīng)的一種試驗,是診斷小兒結(jié)核病比較有價值的一項檢查4、第四實驗室檢查:主要有以下幾個方面:①細菌學(xué)診斷;常用的有涂片栓菌和結(jié)核菌培養(yǎng)兩種方法,可用痰液,胃液,腦站脊液進行檢查,結(jié)核菌的檢出是診斷結(jié)核病最有力的證據(jù)。②結(jié)核菌的基因診斷:主要有聚合酶鏈反應(yīng)(pcr),核酸指印技術(shù)等方法,這一類檢測方法的特點是快速、靈敏,特異性強。③免疫學(xué)診斷:包括結(jié)合菌抗原和抗結(jié)合抗體的檢查,也是一種快速、簡便有價值的實驗室輔助檢查 作為一種補充,肺結(jié)核既然由結(jié)核菌引起,就應(yīng)該可以使用結(jié)核菌檢測方法,主要有三種大類檢測法:細菌學(xué)、免疫學(xué)、分子生物學(xué)。 傳統(tǒng)實驗室常見的結(jié)核菌細菌學(xué)檢測方法有如下5種,但該傳統(tǒng)方法的準確率較低。 (1)痰涂片鏡檢法:是全世界的結(jié)核病實驗室外都在使用的最基本的細菌學(xué)檢查方法,其特點是簡單、快速和價廉,當天出結(jié)果,但無法辨別死菌活菌;敏感性低,通常需5000-10000條菌/ml才能夠得到陽性結(jié)果;特異性差,各種抗酸桿菌均可著色,需要通過進一步試驗才可確定是否為結(jié)核菌,有關(guān)這一方法的改進研究和評價很多,但由于檢測原理的限制,不可能出現(xiàn)突破性的進展。 ?。?)痰結(jié)核菌常規(guī)培養(yǎng)法:是鑒定死菌活菌的可靠方法,被譽為“黃金標準”。缺點是時間長,需求周才能報出結(jié)果,且敏感性低,涂片陽性標本只有約80%培養(yǎng)陽性;特異性差,各種分枝桿菌均可生長,需結(jié)合藥物敏感性試驗和分枝桿菌菌種鑒定,才可確定是否為結(jié)核菌。 ?。?)藥物敏感性試驗:用于鑒定結(jié)核菌對抗菌素結(jié)核藥物的敏感性水平。這項試驗通常是在痰結(jié)核菌培養(yǎng)的基礎(chǔ)上進行的,故需時更長。 ?。?)分枝桿菌菌種鑒定:是根據(jù)不同分枝桿菌的理化特性,以生物化學(xué)的方法為主。醫(yī).學(xué)教育網(wǎng)搜集整理可以精確地鑒定分枝桿菌的不同菌種,但操作復(fù)雜,且個別試驗使用的藥品,有一定的危險性。 ?。?)痰結(jié)核菌快速培養(yǎng)系統(tǒng):20世紀70年代發(fā)展的一種新的結(jié)核病細菌學(xué)檢查方法——痰結(jié)核菌快速培養(yǎng)、藥敏系統(tǒng)。該方法將陽性檢出時間較L-J法明顯縮短,從常規(guī)培養(yǎng)的8周縮短到3-14d,且具有操作簡便、自動化強、靈敏度高等優(yōu)點,在結(jié)核病的細菌學(xué)診斷中起到了重要作用,促進了結(jié)核病細菌學(xué)診斷的發(fā)展。主要問題是儀器與試劑的價格昂貴,難以廣泛應(yīng)用。 ** 常見的分子生物學(xué)檢測法**:采用TaqMan探針熒光聚合酶鏈式反應(yīng)技術(shù)原理,可在1天內(nèi)完成臨床樣品處理、核酸提取和熒光PCR檢測方法,具有快速簡便,特異性強、敏感度高的特點,主要用于早期確診。 免疫學(xué)診斷:包括結(jié)合菌抗原和抗結(jié)合抗體的檢查,也是一種快速、簡便有價值的實驗室輔助檢查。 其他檢查1、纖維支氣管鏡檢查:可以直接觀察或間接判斷支氣管、肺內(nèi)病變,并且有活組織檢查、灌洗、錄像、拍攝氣管內(nèi)照片等功能,對于診斷和鑒別診斷特別有用。肺部X線檢查不但可早期發(fā)現(xiàn)肺結(jié)核,而且可對病兆的部位、范圍、性質(zhì)、發(fā)展情況和效果作出診斷。
肺結(jié)核病由結(jié)核分枝桿菌引起,結(jié)核分枝桿菌(M.tuberculosis),俗稱結(jié)核桿菌,是引起結(jié)核病的病原菌,可侵犯全身各器官,以肺結(jié)核為最多見。結(jié)核分枝桿菌檢測方法主要有:一、結(jié)核菌素試驗結(jié)核菌素試驗是應(yīng)用結(jié)核菌素進行皮膚試驗來測定機體對結(jié)核分枝桿菌是否能引起超敏反應(yīng)的一種試驗。二、結(jié)核菌γ干擾素釋放試驗細胞免疫介導(dǎo)的結(jié)核菌γ干擾素釋放試驗(T-cell interferon gamma release assays,TIGRA,又稱IFNGRA或GRA)是近年來采用酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)或酶聯(lián)免疫斑點(ELISPOT)法定量檢出受檢者全血或外周血單個核細胞對結(jié)核分枝桿菌特異性抗原的IFN-γ檢測釋放反應(yīng),用于結(jié)核菌潛伏感染的診斷。IFN-γ為Thl細胞分泌的一種細胞因子,不但能夠反映機體結(jié)核的Thl細胞免疫情況,還與體內(nèi)結(jié)核菌的抗原含量密切相關(guān)。被結(jié)核分枝桿菌抗原致敏的T細胞再遇到同類抗原時能產(chǎn)生高水平的IFN-γ,因此被用于結(jié)核潛伏感染的診斷。三、微生物學(xué)檢查法1.標本標本的選擇根據(jù)感染部位??扇√?、支氣管灌洗液、尿、糞、腦脊液或胸、腹水。其他肺外感染可取血或相應(yīng)部位分泌液或組織細胞。2.直接涂片鏡檢3.濃縮集菌4.分離培養(yǎng)將經(jīng)中和集菌材料接種于固體培養(yǎng)基,器皿口加橡皮塞于37℃培養(yǎng),每周觀察1次。結(jié)核分枝桿菌生長緩慢,一般需2~4周長成肉眼可見的落菌。液體培養(yǎng)可將集菌材料滴加于含血清的培養(yǎng)液,則可于1~2周在管底見有顆粒生長。取沉淀物作涂片,能快速獲得結(jié)果,并可進一步作生化、藥敏等測定和區(qū)分結(jié)核分枝桿菌與非結(jié)核分枝桿菌。國內(nèi)學(xué)者已證明結(jié)核分枝桿菌L型可存在于血細胞內(nèi)或粘附于細胞表面。這種患者往往血沉加快,用低滲鹽水溶血后立即接種高滲結(jié)核分枝桿菌L型培養(yǎng)基能提高培養(yǎng)陽性率。5.動物試驗將集菌后的材料注射于豚鼠腹股溝皮下,3~4周后若局部淋巴結(jié)腫大,結(jié)核菌素試驗陽轉(zhuǎn),即可進行解剖。觀察肺、肝、淋巴結(jié)等器官有無結(jié)核病變,并作形態(tài)、培養(yǎng)等檢查。若6~8周仍不見發(fā)病,也應(yīng)進行解剖檢查。四、快速診斷法目前已將多聚酶鏈反應(yīng)(PCR)擴增技術(shù)應(yīng)用于結(jié)核分枝桿菌DNA鑒定,每ml中只需含幾個細菌即可獲得陽性,且1-2d得出結(jié)果。操作中需注意實驗器材的污染問題,以免出現(xiàn)假陽性。又細菌L型由于缺壁并有代償性細胞膜增厚,而一般常用的溶菌酶不能使細胞膜破裂釋出DNA,以致造成PCR假陰性。用組織磨碎器充分研磨使細胞破裂后,則可出現(xiàn)陽性。目前有條件的單位使用BACTEC法,以含14C棕櫚酸作碳源底物的7H12培養(yǎng)基,測量在細菌代謝過程中所產(chǎn)生的14C量推算出標本中是否有抗酸桿菌,5~7d就可出報告。
總結(jié)
以上是生活随笔為你收集整理的肺结核病菌的检测方法有哪些?各有什么优势?的全部內(nèi)容,希望文章能夠幫你解決所遇到的問題。
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