問題太寬泛了，簡要說一下目前多基因轉化在技術上面臨的問題：多基因改良策略雖然具有許多至今尚無法準確評估的優點,但就象其他新生的技術一樣,它也存在著許多技術上迫切需要進一步解決的問題。根據我們的初步實踐,我們認為:①在生物的遺傳改良中,并不一定是基因愈多,親緣關系愈遠愈好,必須根據基因工程的目的來確定選用那些基因和用多少個基因;②應進一步大力開展功能基因組的研究,克隆出更多有實用價值的功能基因以作為今后發展的基礎;③進一步改進多基因轉化技術的細節,如更好的多基因表達載體的構建,更有效的多基因轉化方法的建立,定點整合技術的建立以及尋找更多樣化的啟動子等;④雖然應用低等生物的基因改良高等生物的遺傳性沒有翻譯后加工的障礙,但當將高等生物基因應用于相對較低等生物的改良時,其翻譯后的加工往往可能會出現障礙。而多個基因在同一個轉基因植株中的轉錄和表達水平往往也不一致。這一難點涉及蛋白質組學和NRA組學,人類至今了解尚少,因此有待于蛋白質組學和RNA組學的發展和配合,才能找到解決的方法;⑤應用多基因改良生物體有可能帶來更為復雜的環境生態問題以及食品安全性問題,因此必須發展無標記基因技術及功能基因的特異性表達技術等。相信只要我們認真對待和深人研究,這些問題終將會獲得解決。

植物多基因轉化在修飾植物多基因代謝途徑和獲得無選擇標記轉基因植株研究中具有巨大應用潛力。1 農桿菌介導煙草多基因轉化 煙草是轉基岡研究的模式植物之一，也是最先利用農桿菌介導法轉化成功的植物。因此，煙草多基因轉化開展較早，研究相對深入。利用農桿菌對煙草進行多基因轉化主要分為一次轉化法和多次轉化法兩種類型。2 水稻多基因轉化 水稻是世界上最主要的糧食作物和單子葉植物的模式植物。自1991年Christou等首先以基因槍法轉化水稻幼胚、1994年Hiei等建立農桿菌介導法轉化粳稻的方法以來，水稻遺傳轉化研究越來越廣泛和深入，包括品質改良、抗蟲育種和抗病育種等，在建立水稻規模化轉基因技術體系的同時，也在嘗試多基因轉化。玉米是是界上分布最廣泛的糧食作物之一，是全球重要的飼料、糧食作物和工業原料，其多基因轉化研究工作也已開始。3.玉米多基因轉化Zhu等曾將Zmpsy1、Pacrt1、Gllycbb、Glbch、ParacrrtW等5個類胡蘿卜素合成相關基因和篩選標記bar基因構建于不同載體上，利用基因槍介導法將這6個由不同啟動子調控的基因轉化缺乏類胡蘿卜素的玉米品種M37W的幼胚，PCR檢證實13%的轉基因植株含有所轉化的5個功能基因，所有轉基因植株生長發育正常，胚乳中出現7種表現型。另一項相關研究利用β－類胡蘿卜素、抗壞血酸和葉酸代謝途徑中相關酶的編碼基因Psy1、crtI、dhar和fdlE分別構建表達載體，其中，psy1基因由小麥低分子量麥谷蛋白啟動子控制，crt I、dhar和falE由大麥醇溶蛋白啟動子調控，利用基因槍法轉化M37W幼胚，PCR檢測證實75株陽性植株中含有全部5個基因，Noethern雜交顯示4個代謝相關基因在轉基因植株中的表達水平較高。4 其他植物多基因轉化 除煙草、水稻和玉米外，其他植物也有多基因轉化的成功報道。Schmidt等利用基因槍法將gfp、npt、ble、gusA、bar和npt共6個基因同時轉化大豆愈傷組織，設計了3種轉化策略，包括單質粒(6個基因構建在同一個載體上)共轉化、多質粒(其中bar基因和npt基因在一個質粒上，其他4個基因分別位于不同質粒上)等體積混合共轉化和多質粒非等體積混合共轉化(bar基因和hpt基因所在的質粒與其他質粒體積比為9:1)。對T0。代的PCR和Southern雜交分析顯示，在單質粒共轉化檢測的7株轉基因植株中，hpt、gfp和nptⅡ基因的轉化效率較高，體積比為1:1的4株共轉化植株中ble基因沉默的較多，而1:9體積比的共轉化只檢測到1株陽性植株，其中ble基因沉默，表明不同轉化策略導致了不同基因的缺失或沉默。

利用多基因轉化策略改良生物體遺傳性方面已經有一些研究進展，一般可采用的策略和方法有：1、重復轉化法（順序轉化法）2、雜交聚合法3、直接轉化法與回交轉育法結合4、非載體DNA轉移途徑導入外源整體DNA5、多載體的共轉化法6、多基因單載體一次性轉化法7、利用同源重組將多個基因同時導入質體中，即質體轉化法。具體內容可以參見論文——《論應用多基因轉化策略綜合改良生物體遺傳性研究方向的前景》。

總結

以上是生活随笔為你收集整理的如何应用多基因转化策略综合改良生物体遗传性研究方向？的全部內容，希望文章能夠幫你解決所遇到的問題。

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