PCR技术对于分子诊断有什么贡献？
生活随笔
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PCR技术对于分子诊断有什么贡献？
小編覺得挺不錯的,現(xiàn)在分享給大家,幫大家做個參考.
聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)可對特定基因進行擴增,因此被廣泛應(yīng)用于獲取特定基因或基因片段及臨床基因診斷等領(lǐng)域.聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)技術(shù)發(fā)明至今已近20年了,近年來出現(xiàn)的熒光定量PCR實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍,它以其特異性強、靈敏度高、重復性好、定量準確、速度快、全封閉反應(yīng)等優(yōu)點成為了分子生物學研究中的重要工具.實時熒光PCR作為新一代分子生物學研究工具，已成為分子診斷、臨床檢驗以及基礎(chǔ)生物醫(yī)學研究的主流技術(shù)平臺，廣泛應(yīng)用于傳染病、腫瘤、遺傳病、心血管等疾病的分子診斷。
分子診斷是當代醫(yī)學發(fā)展的重要前沿領(lǐng)域之一，其核心技術(shù)是基因診斷，常規(guī)技術(shù)包括：（1）聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）；（2）DNA測序（DNA sequencing）；（3）熒光原位雜交技術(shù)（FISH）；（4）DNA印跡技術(shù)（ DNA blotting ）；（5）單核苷酸多態(tài)性（SNP）；（6）連接酶鏈反應(yīng)（LCR）；（7）基因芯片技術(shù)（gene chip）。PCR產(chǎn)品靈敏度高、特異性強、診斷窗口期短，可進行定性、定量檢測，可廣泛用于肝炎、性病、肺感染性疾病、優(yōu)生優(yōu)育、遺傳病基因、腫瘤等，填補了早期免疫檢測窗口期的檢測空白，為早期診斷、早期治療、安全用血提供了有效的幫助。
聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)是一種基礎(chǔ)技術(shù)，對于分子診斷我覺得是具有決定性的，沒有PCR，分子診斷也不知從何說起，PCR為分子診斷提供了技術(shù)和理論支持，其特異性強、靈敏度高、重復性好、定量準確、速度快，分子診斷需要的就是吸收這些優(yōu)良特點，加以改進應(yīng)用
PCR技術(shù)在分子診斷上的應(yīng)用：1）感染性疾病的分子診斷定性或定量的檢測致病微生物的核酸，已經(jīng)用于病毒、細菌和寄生蟲感染的診斷。2）單基因遺傳性疾病的基因診斷3）多基因病的相關(guān)基因的診斷4）腫瘤相關(guān)基因的分子診斷、5）移植配型和法醫(yī)學上的應(yīng)用
感謝 @youyuxing188 的邀請。我個人認為，PCR對于分子診斷的貢獻才剛剛開始，這是因為：我們目前對于PCR反應(yīng)的認識比較粗狂，PCR實驗還做不到如同控制計算機一樣精確。對于PCR反應(yīng)中背景DNA、陽離子、陰離子以及各種二級結(jié)構(gòu)中間體如何影響PCR反應(yīng)的了解還處于黑匣子階段，更不要說精確預測和控制。好在當前各種組學、結(jié)構(gòu)等方面的發(fā)展較為迅速，為我們深刻理解PCR反應(yīng)的精細過程提供了可能。PCR變種技術(shù)將發(fā)揮更大作用。實時定量PCR目前應(yīng)用較為廣泛，數(shù)字PCR的定量能力讓人嘆服，ARMS的對突變檢測高選擇性，結(jié)合了二代測序的高通量多重PCR，LAMP的便捷等，不同變種有不同的長處，可以預見，將有更多地變種技術(shù)發(fā)展出來。PCR結(jié)果鑒定技術(shù)也在快速發(fā)展之中。經(jīng)典的凝膠電泳，熒光，分辨率極高的毛細管電泳，還有二代測序等技術(shù)也將極大提高PCR技術(shù)的應(yīng)用范圍和深度。PCR在理論與技術(shù)層面都需要更多地研究和實踐，一直以來在實踐方面做的倒是很多，但在理論分析方面可能因為不是研究熱門，發(fā)不了大文章，鮮有人從事這一領(lǐng)域。個人拙見，拋磚引玉。
分子診斷是當代醫(yī)學發(fā)展的重要前沿領(lǐng)域之一，其核心技術(shù)是基因診斷，常規(guī)技術(shù)包括：（1）聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）；（2）DNA測序（DNA sequencing）；（3）熒光原位雜交技術(shù)（FISH）；（4）DNA印跡技術(shù)（ DNA blotting ）；（5）單核苷酸多態(tài)性（SNP）；（6）連接酶鏈反應(yīng)（LCR）；（7）基因芯片技術(shù)（gene chip）。分子診斷的主要技術(shù)有核酸分子雜交、聚合酶鏈反應(yīng)和生物芯片技術(shù)。1.核酸分子雜交技術(shù) 具有一定互補序列和核苷酸單鏈在液相或固相中按堿基互補配對原則締合成異質(zhì)雙鏈的過程，稱為核酸分子雜交。雜交的雙方是待測核酸序列和探針序列。應(yīng)用該技術(shù)可對特定DNA或RNA序列進行定性或定量檢測。2.聚合酶鏈反應(yīng)（即Polymerase chain reaction，PCR）[3] 原理：PCR是模板DNA，引物和四種脫氧核糖核昔三磷酸（dNTP）在DNA聚合酶作用下發(fā)生酶促聚合反應(yīng)，擴增出所需目的DNA。包括三個基本步驟：雙鏈DNA模板加熱變性成單鏈（變性）；在低溫下引物與單鏈DNA互補配對（退火）；在適宜溫度下TapDNA聚合酶催化引物沿著模板DNA延伸。3.生物芯片技術(shù)是近年發(fā)展起來的分子生物學與微電子技術(shù)相結(jié)合的核酸分析檢測技術(shù)。最初的生物芯片技術(shù)主要目標是用于DNA序列測定、基因表達譜鑒定和基因突變體檢測和分析，所以又稱為DNA芯片或基因芯片技術(shù)。由于目前這一技術(shù)已擴展至免疫反應(yīng)、受體結(jié)合等非核酸領(lǐng)域，出現(xiàn)了蛋白質(zhì)芯片、免疫芯片、細胞芯片、組織芯片等，所以改稱生物芯片技術(shù)更符合發(fā)展趨勢。
分子診斷是當代醫(yī)學發(fā)展的重要前沿領(lǐng)域之一，其核心技術(shù)是基因診斷，常規(guī)技術(shù)包括：（1）聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）；（2）DNA測序（DNA sequencing）；（3）熒光原位雜交技術(shù)（FISH）；（4）DNA印跡技術(shù)（ DNA blotting ）；（5）單核苷酸多態(tài)性（SNP）；（6）連接酶鏈反應(yīng)（LCR）；（7）基因芯片技術(shù)（gene chip）。PCR產(chǎn)品靈敏度高、特異性強、診斷窗口期短，可進行定性、定量檢測，可廣泛用于肝炎、性病、肺感染性疾病、優(yōu)生優(yōu)育、遺傳病基因、腫瘤等，填補了早期免疫檢測窗口期的檢測空白，為早期診斷、早期治療、安全用血提供了有效的幫助。
聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)是一種基礎(chǔ)技術(shù)，對于分子診斷我覺得是具有決定性的，沒有PCR，分子診斷也不知從何說起，PCR為分子診斷提供了技術(shù)和理論支持，其特異性強、靈敏度高、重復性好、定量準確、速度快，分子診斷需要的就是吸收這些優(yōu)良特點，加以改進應(yīng)用
PCR技術(shù)在分子診斷上的應(yīng)用：1）感染性疾病的分子診斷定性或定量的檢測致病微生物的核酸，已經(jīng)用于病毒、細菌和寄生蟲感染的診斷。2）單基因遺傳性疾病的基因診斷3）多基因病的相關(guān)基因的診斷4）腫瘤相關(guān)基因的分子診斷、5）移植配型和法醫(yī)學上的應(yīng)用
感謝 @youyuxing188 的邀請。我個人認為，PCR對于分子診斷的貢獻才剛剛開始，這是因為：我們目前對于PCR反應(yīng)的認識比較粗狂，PCR實驗還做不到如同控制計算機一樣精確。對于PCR反應(yīng)中背景DNA、陽離子、陰離子以及各種二級結(jié)構(gòu)中間體如何影響PCR反應(yīng)的了解還處于黑匣子階段，更不要說精確預測和控制。好在當前各種組學、結(jié)構(gòu)等方面的發(fā)展較為迅速，為我們深刻理解PCR反應(yīng)的精細過程提供了可能。PCR變種技術(shù)將發(fā)揮更大作用。實時定量PCR目前應(yīng)用較為廣泛，數(shù)字PCR的定量能力讓人嘆服，ARMS的對突變檢測高選擇性，結(jié)合了二代測序的高通量多重PCR，LAMP的便捷等，不同變種有不同的長處，可以預見，將有更多地變種技術(shù)發(fā)展出來。PCR結(jié)果鑒定技術(shù)也在快速發(fā)展之中。經(jīng)典的凝膠電泳，熒光，分辨率極高的毛細管電泳，還有二代測序等技術(shù)也將極大提高PCR技術(shù)的應(yīng)用范圍和深度。PCR在理論與技術(shù)層面都需要更多地研究和實踐，一直以來在實踐方面做的倒是很多，但在理論分析方面可能因為不是研究熱門，發(fā)不了大文章，鮮有人從事這一領(lǐng)域。個人拙見，拋磚引玉。
分子診斷是當代醫(yī)學發(fā)展的重要前沿領(lǐng)域之一，其核心技術(shù)是基因診斷，常規(guī)技術(shù)包括：（1）聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）；（2）DNA測序（DNA sequencing）；（3）熒光原位雜交技術(shù)（FISH）；（4）DNA印跡技術(shù)（ DNA blotting ）；（5）單核苷酸多態(tài)性（SNP）；（6）連接酶鏈反應(yīng)（LCR）；（7）基因芯片技術(shù)（gene chip）。分子診斷的主要技術(shù)有核酸分子雜交、聚合酶鏈反應(yīng)和生物芯片技術(shù)。1.核酸分子雜交技術(shù) 具有一定互補序列和核苷酸單鏈在液相或固相中按堿基互補配對原則締合成異質(zhì)雙鏈的過程，稱為核酸分子雜交。雜交的雙方是待測核酸序列和探針序列。應(yīng)用該技術(shù)可對特定DNA或RNA序列進行定性或定量檢測。2.聚合酶鏈反應(yīng)（即Polymerase chain reaction，PCR）[3] 原理：PCR是模板DNA，引物和四種脫氧核糖核昔三磷酸（dNTP）在DNA聚合酶作用下發(fā)生酶促聚合反應(yīng)，擴增出所需目的DNA。包括三個基本步驟：雙鏈DNA模板加熱變性成單鏈（變性）；在低溫下引物與單鏈DNA互補配對（退火）；在適宜溫度下TapDNA聚合酶催化引物沿著模板DNA延伸。3.生物芯片技術(shù)是近年發(fā)展起來的分子生物學與微電子技術(shù)相結(jié)合的核酸分析檢測技術(shù)。最初的生物芯片技術(shù)主要目標是用于DNA序列測定、基因表達譜鑒定和基因突變體檢測和分析，所以又稱為DNA芯片或基因芯片技術(shù)。由于目前這一技術(shù)已擴展至免疫反應(yīng)、受體結(jié)合等非核酸領(lǐng)域，出現(xiàn)了蛋白質(zhì)芯片、免疫芯片、細胞芯片、組織芯片等，所以改稱生物芯片技術(shù)更符合發(fā)展趨勢。
總結(jié)
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