科研人生美得很，回想當初第一次獨立進行細胞實驗的時候，發現自己還是不會細胞計數，哪怕已經跟著師兄師姐一起操作了N多回。害！這還不是科室經費不足惹得禍么！

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經費要是足夠多，可就能用上自動細胞計數儀了，但最準的還是原始版本的純手動細胞計數（即用細胞計數板在顯微鏡下計數）。之前我偶然發現某大牌細胞計數儀使用一段時間后（大約三個月），它的系統就出現錯亂，顯示得出的細胞數量級還有參考性，但反應細胞死活的比例時，用細胞計數板加上臺盼藍手動計數的結果和用細胞計數儀標配的細胞計數板加上臺盼藍的計數結果相比較，得到了完全相反的數據，手動計數發現細胞成活率在95%以上，可儀器顯示細胞死亡率在95%以上。所以，今兒個咱們還是需要好好了解一下純手動細胞計數的詳細步驟！

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假如我們有個實驗目的是準備給小鼠種皮下瘤，但這個實驗對腫瘤細胞數量有著最低的要求，那么我們到底該咋辦呢？

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從培養箱中取出需要備用的腫瘤細胞，在顯微鏡下觀察細胞是否為單層細胞，最好是處于對數生長期的細胞，然后用胰酶消化它，預期制備總的細胞濃度為6 x?106cell/3mL的腫瘤細胞懸液（用PBS制備細胞懸液）。

假設共有27只小鼠需要種腫瘤，每只小鼠2x?105個細胞，并注射100uL，因此可以準備30只小鼠的細胞量，即3000uL（3mL）體積的PBS里含有6x 106個細胞。于是我們期望細胞的數量能超過6x?106個細胞。

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為了達成目的，我們將細胞處理的詳細過程分為A和B兩個部分：

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A細胞計數的方法

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[1] 準備計數板：用無水乙醇或 95%乙醇清潔計數板和蓋玻片，待干燥后，把蓋玻片覆在計數板上面，使之微微移向一側，露出計數板臺面少許；

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總結

以上是生活随笔為你收集整理的实验新手必须知道的细胞计数技巧的全部內容，希望文章能夠幫你解決所遇到的問題。

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