细胞培养中出现黑胶虫污染处理方法
? ? “黑膠蟲”可寄生于動物細胞,也可以生存于培養基中,依靠細胞和培養基中的營養為生,并隨細胞傳代而傳代。可見“黑膠蟲”是一種異養生物。我們在細胞培養中出現黑膠蟲后污染怎么辦?下面有幾個處理建議,我們一起來了解下吧!
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1.換好一點的血清,這樣可以有效減少“小黑點”的形成。一般的血清都不要去滅活處理,為什么呢?
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? ? 因為經過正確處理的熱滅活血清,對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或完全沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量,而造成細胞生長速率的降低。而經過熱滅活的血清,沉淀物的形成會顯著增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。除非是在做免疫學研究或培養干細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時,才推薦做熱滅活。所以在不是做免疫學研究或培養干細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞培養時,血清盡量不經熱滅活。
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2.如果是貼壁細胞的話,可用無菌的PBS洗幾次,可一定程度上緩解。若是懸浮的話,就不太好處理拉,可以向其中少加一點滋養細胞。加滋養細胞對有黑膠蟲的剛復蘇的細胞很有效!還有就是實驗環境要注意好,保持細胞間整個環境的潔凈度。如果細胞不是非常珍貴,可以用伯氨奎、磺胺、四環素、貝尼爾,也有建議慶大霉素500ug/ml洗滌。
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3.換用好的一次性塑料培養瓶。
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4.停止復蘇,停止養細胞,徹底消毒所有用于細胞培養的一切用品,包括所用的培養瓶,培養基,吸管,胰酶,孵箱,超凈臺、空間等等你能想到的和細胞培養相關的所有物品。一個星期后,再復蘇污染之前凍存的細胞,注意你的白大衣衣袖污染即可。這樣你可能覺得動作太大,但可以用一個星期的時間挽救兩個月的時間,還有其他你為了找到污染源,去除污染所耗費的精力,和財力。
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總結
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