基因捕獲技術(shù)是一種基因克隆的方法，是繼自然突變、物理突變和化學(xué)突變之后發(fā)展起來(lái)的新的分子生物學(xué)方法，可用于尋找、鑒定和研究大量未知功能和已知功能的活化基因。該技術(shù)操作的核心是基因捕獲載體，是一種帶有報(bào)告基因和/或選擇標(biāo)記基因的不完整的基因表達(dá)載體，這些載體所帶的基因只有在整合到宿主功能基因內(nèi)部且與融合的宿主基因編碼框一致時(shí)才能得以表達(dá)。根據(jù)報(bào)告基因在載體中的位置及報(bào)告基因激活表達(dá)的方式，基因捕獲載體分為3種類型：增強(qiáng)子捕獲載體，啟動(dòng)子捕獲載體以及基因捕獲載體。增強(qiáng)子捕獲載體含有一個(gè)最小的啟動(dòng)子和翻譯起始位點(diǎn)，當(dāng)載體整合到順式增強(qiáng)子元件附近時(shí)，此增強(qiáng)子將調(diào)控報(bào)告基因的表達(dá) 。關(guān)于增強(qiáng)子捕獲的誘變比率還未見(jiàn)報(bào)道，但插入的性質(zhì)預(yù)示由增強(qiáng)子捕獲產(chǎn)生功能失活的突變比率較低，因此，增強(qiáng)子捕獲載體在小鼠體系中未得到廣泛應(yīng)用。啟動(dòng)子捕獲載體通常由不含啟動(dòng)子成分的報(bào)告基因和一篩選標(biāo)記基因組成，只有當(dāng)載體插入到內(nèi)源基因編碼區(qū)序列中產(chǎn)生融合轉(zhuǎn)錄本時(shí)報(bào)告基因才可能表達(dá) ，因而啟動(dòng)子捕獲的致突變比率很高。然而載體插入到外顯子的頻率非常低，捕獲效率較增強(qiáng)子捕獲至少低200倍?；虿东@載體中在無(wú)啟動(dòng)子序列的報(bào)告基因上游和下游分別含有剪接受體和多聚腺苷酸加尾序列，當(dāng)含有順式作用的啟動(dòng)子和增強(qiáng)子元件被捕獲基因轉(zhuǎn)錄激活時(shí),載體中SA 與內(nèi)源基因剪接供體作用產(chǎn)生上游內(nèi)源基因編碼序列與報(bào)告基因融合轉(zhuǎn)錄本，使內(nèi)源基因發(fā)生突變，同時(shí)報(bào)告基因的表達(dá)提示內(nèi)源基因的表達(dá)特點(diǎn)。

總結(jié)

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