RT-PCR、QPCR、Real-time PCR、Real-time RT-PCR区别(自用)
什么是 RT-PCR?
RT-PCR 就是逆轉錄 PCR(reverse transcription PCR)或者稱反轉錄 PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR),是聚合酶鏈式反應(PCR)的一種廣泛應用的變形。在 RT-PCR 中,一條 RNA鏈被逆轉錄成為互補 DNA,再以此為模板通過 PCR 進行 DNA 擴增。
那什么是 qPCR、Real-time-PCR?
其實 Real-time-PCR 和 qPCR(Quantitative Rea-time-PCR)是一碼事,都是實時定量 PCR,指的是
PCR 過程中每個循環都有數據的實時記錄,因此可以對起始模板數量進行精確的分析。
雖然 Real-time PCR(實時熒光定量 PCR)和 Reverse transcription PCR(反轉錄PCR)看起來都可以縮寫為 RT-PCR,但是,國際上的約定俗成的是:RT-PCR 特指反轉錄 PCR,而 Real-time PCR一般縮寫為 qPCR(quantitative real-time PCR)。
那什么是 real-time RT-PCR(或 RT-qPCR)?
real-time RT-PCR 中間的「RT」是 reverse transcription(逆轉錄),整個意思就是利用 mRNA 或總RNA 為模板的實時逆轉錄 PCR 技術(quantitative Real-time RT-PCR)。real time RT-PCR 指的是 qPCR+RT-PCR 的組合,是說將 mRNA 逆轉錄為 cDNA 后再作為模板進行實時熒光 PCR 分析,因為 RT-PCR 是可以定性的,但不能進行定量檢測的。
所以不難理解 real-time RT-PCR(RT-qPCR)就是結合了熒光定量技術的反轉錄 PCR:先從 RNA 反轉錄得到cDNA(RT),然后再用 Real-time PCR 進行定量分析(qPCR)。所以,實時熒光定量 PCR,它不僅可以用 cDNA 作為模板,也可以用基因組 DNA 等作為模板。
有時候搞清楚這些概念也很重要,你分清了嗎?
作者:大師兄 鏈接:http://paper.dxy.cn/article/510973
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總結
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