matlab计算每个细胞面积,手把手教你用Imaris 计算细胞面积
手把手教你用Imaris 計(jì)算細(xì)胞面積以下文字資料是由(歷史新知網(wǎng)www.lishixinzhi.com)小編為大家搜集整理后發(fā)布的內(nèi)容,讓我們趕快一起來(lái)看一下吧!
收了這份AI 科研插圖教程,你就是CNS 級(jí)的配圖大師了寫(xiě)文章吐槽自己的博士生活,都能發(fā)Science?我好酸呀…某「知名國(guó)際期刊」:受精卵或非生命起點(diǎn)。這結(jié)論是認(rèn)真的嗎…這項(xiàng)諾貝爾獎(jiǎng)技術(shù),成功應(yīng)用于治脫發(fā),被評(píng)為可徹底改變頭發(fā)再生的重大突破
老話重提,統(tǒng)計(jì)圖,和科研領(lǐng)域里的大多數(shù)圖像數(shù)據(jù)伴生,是一種大家喜聞樂(lè)見(jiàn)的,直觀表現(xiàn)數(shù)據(jù)結(jié)果的形式。只要是個(gè)圖如果沒(méi)有伴隨統(tǒng)計(jì),reviewers總會(huì)叨叨「請(qǐng)給出統(tǒng)計(jì)結(jié)果」。加上統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)的文章看起來(lái)的確更具說(shuō)服力呢!之前我們推出的第一個(gè)教程《手把手教你用軟件便捷地?cái)?shù)細(xì)胞》,既教你認(rèn)識(shí)這個(gè)軟件Imaris,又教你怎么數(shù)密密麻麻的細(xì)胞,區(qū)分不同的marker陽(yáng)性的細(xì)胞以及計(jì)數(shù)它們。
那么問(wèn)題來(lái)了,如果有人并不關(guān)心細(xì)胞數(shù)量,而關(guān)心細(xì)胞的面積,那該如何是好呢?
一般在研究細(xì)胞生長(zhǎng)時(shí)候非常實(shí)用,如評(píng)估同等量細(xì)胞的生長(zhǎng)速度,通過(guò)比較體外培養(yǎng)細(xì)胞的匯合率來(lái)得到初步結(jié)論;或研究不同類(lèi)型細(xì)胞的表面積,給細(xì)胞分型。舉個(gè)例子(為了保護(hù)自己的數(shù)據(jù)隱私,我只是隨便拿個(gè)廢棄的不怎好看的圖來(lái)演示如何使用軟件)
1.打開(kāi)軟件Imaris,打開(kāi)圖片,在工具欄點(diǎn)擊「surface」按鈕(紅色箭頭所示),即可出現(xiàn)如藍(lán)框所示的Surface 1。
2. 讓大家看一眼原始的圖片,并明確下此行目的:將當(dāng)前界面紅色陽(yáng)性的區(qū)域的表面積計(jì)算出來(lái)(你也可以計(jì)算明場(chǎng)細(xì)胞的面積,細(xì)胞核的面積等等)。
3.點(diǎn)擊左下方「Next」朝右的箭頭(紅色箭頭所示),此處先不要點(diǎn)擊橘黃色箭頭所示的方框,自動(dòng)完成的surface可能不那么準(zhǔn)確,但是如果你只是大略看看面積,建議使用automatic creation,一步到位。
4. 之后界面變成2/4 Algorithm,此時(shí)可以調(diào)節(jié)的界面有Smooth.
5.接著點(diǎn)擊「Next」的藍(lán)色箭頭,系統(tǒng)開(kāi)始創(chuàng)建surface,界面轉(zhuǎn)換為下面的樣子。之前紅色信號(hào)陽(yáng)性的區(qū)域被灰色的實(shí)心區(qū)域覆蓋。
通過(guò)調(diào)節(jié)紅色方框highlight 的淺黃色矩形的面積可以讓surface 被創(chuàng)建的更密集or 稀疏(調(diào)大黃色區(qū)域,更密集;反之更稀疏)。
6. 當(dāng)發(fā)現(xiàn)自動(dòng)調(diào)節(jié)的閾值覆蓋了更多的區(qū)域——如靠上面的面積非常小的紅色信號(hào)區(qū)域也被灰色的surface 覆蓋了,但是這些顯然并不是細(xì)胞,那么我們就往右拖動(dòng)淺黃色區(qū)域,得到如下的圖。
7.點(diǎn)擊「Next」,得到如下被加工好的圖。系統(tǒng)將灰色變成了白色,通過(guò)視覺(jué)變化決定是否對(duì)圖進(jìn)行調(diào)整,此時(shí)可以回到4個(gè)進(jìn)程的任何一步再進(jìn)行修繕,確定沒(méi)有修改之處后再進(jìn)行下一步來(lái)最終確認(rèn)所有的操作。
8.點(diǎn)擊「完成」按鈕(紅色箭頭所示),此時(shí)開(kāi)弓沒(méi)有回頭箭了,且我們也將要得到我們想要的分析結(jié)果。
9. 完成(此時(shí)建立的surface 變成通道顏色-紅色。并且與之前的信號(hào)疊加起來(lái)。可以點(diǎn)擊勾掉通道螢光,只留下surface,觀察一下是否合意)。
10. 如下是僅有surface 的界面(和原始圖片比較一下,更好看了呢)。
11. 在(紅色矩形標(biāo)記的)數(shù)據(jù)曲線處的detailed 欄目里可以找到圖中所有(specific values)的surface 的面積(Area)數(shù)據(jù)。
12. 將這些數(shù)據(jù)復(fù)制或者輸出(點(diǎn)擊下方的保存按鈕)到excel 里。進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。針對(duì)體外培養(yǎng)的細(xì)胞,有時(shí)會(huì)有一些雜質(zhì),此時(shí)可以在excel里將不是細(xì)胞大小的全部去掉即得到了所有surface的面積信息。
當(dāng)然關(guān)于surface 的螢光強(qiáng)度、位置等信息也可以一并在Imaris 軟件中的Detailed 欄目的下拉框中選擇并保存獲取。
13. 如果是體外培養(yǎng)細(xì)胞分析匯合率,則從拍攝軟件中可以獲取整個(gè)圖片區(qū)域的面積(或者從Imaris 里獲取,如下圖,獲得XY 軸的最大量程計(jì)算表面積),并用總的細(xì)胞面積除以區(qū)域總面積獲得匯合率。
今天的分享結(jié)束啦,敬請(qǐng)期待后續(xù)的系列教程哦~
封面來(lái)源:站酷海洛Plus 圖片來(lái)源:作者提供 照片由Chokniti Khongchum從Pexels
話題: IMARIS, reviewers, 細(xì)胞結(jié)構(gòu)生物顯微影像分析軟體, 細(xì)胞面積
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與50位技術(shù)專家面對(duì)面20年技術(shù)見(jiàn)證,附贈(zèng)技術(shù)全景圖總結(jié)
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